枯草芽孢杆菌对副干酪乳杆菌细菌素生成和LuxS基因表达的影响

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副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)HD1.7分离自乳酸酸菜的发酵液,研究发现,其发酵液中含有可部分抑制革兰氏阳性细菌(G+)、革兰氏阴性细菌(G-及真菌的细菌素Paracin1.7。细菌素Paracin1.7具有较广的抑菌谱范围,作为新型的食品防腐剂,具有重要的研究价值。本研究以此为出发点,通过共培养等手段,探讨副干酪乳杆菌细菌素Paracin1.7的产生与枯草芽孢杆菌之间的相互关系,通过将枯草芽孢杆菌的菌体和培养上清液分别与阈值浓度的HD1.7共培养,探讨枯草芽孢杆菌是否能够促进副干酪乳杆菌产生细菌素。同时,采用QRT-PCR检测枯草芽孢杆菌的菌体和培养上清液对副干酪乳杆菌中luxS基因表达量变化的影响,从机理上揭示细菌素的产生与群体感应的关系。通过将副干酪乳杆菌HD1.7与枯草芽孢杆菌进行共培养后发现,菌株HD1.7的上清液,对枯草芽孢杆菌的生长具有抑制作用,并且不同菌体密度时,其上清液的作用效果不同。当HD1.7菌体密度为106 CFU/mL和107CFU/mL时,枯草芽孢杆菌的生长周期延长;当菌体密度为108 CFU/mL和109 CFU/mL时,会完全抑制枯草芽孢杆菌的生长;同时枯草芽孢杆菌的菌体和培养上清液对Paracin1.7的产生均具有促进作用;枯草芽孢杆菌的菌体和培养上清液均可以促进副干酪乳杆菌HD1.7中LuxS基因的表达,后者可使LuxS基因的表达量更高,说明枯草芽孢杆菌中的信号刺激因子主要存在于菌体发酵液上清中。进一步研究表明,当将枯草芽孢杆菌上清液经过硫酸铵沉淀、CM Sepharose Fast Flow 阳离子交换层析初步分离后,纯化的分离物对阈值浓度菌株HD1.7 Paracin1.7的产生依然有促进作用,产生的细菌素效价为101.68±1.76AU/mL。本研究进一步证实,枯草芽孢杆菌也可以产生某种物质刺激副干酪乳杆菌产生细菌素,该种物质称为信号分子。本研究为群体效应理论奠定了试验基础,也为今后提高细菌素产量并广泛应用于食品,药品行业奠定了理论基础。
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