【摘 要】
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蜜蜂是重要的授粉昆虫,近年来蜂群崩溃失调症（Colony collapse disorder,CCD）的频繁发生导致蜂群数量锐减,化学农药被认为是造成该现象的原因之一。蜂王幼虫的健康对蜂群发展壮大至关重要,食物的摄入为其对农药残留的重要暴露途径。蜂王幼虫的食物是蜂王浆,而蜂王浆是由取食蜂粮、花粉和蜂蜜的哺育蜂分泌形成的。目前基于蜂王幼虫食物中的农药残留开展对其生长发育影响的探究报道较少。因此,本文
【基金项目】
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国家自然基金项目“蜜蜂幼虫食物形成过程中农药残留加工因子、代谢转化及暴露风险”（32172460）
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蜜蜂是重要的授粉昆虫,近年来蜂群崩溃失调症（Colony collapse disorder,CCD）的频繁发生导致蜂群数量锐减,化学农药被认为是造成该现象的原因之一。蜂王幼虫的健康对蜂群发展壮大至关重要,食物的摄入为其对农药残留的重要暴露途径。蜂王幼虫的食物是蜂王浆,而蜂王浆是由取食蜂粮、花粉和蜂蜜的哺育蜂分泌形成的。目前基于蜂王幼虫食物中的农药残留开展对其生长发育影响的探究报道较少。因此,本文基于连续2年采集的蜂花粉、蜂蜜、蜂粮和蜂王浆样品中4种双酰胺类杀虫剂（氯虫苯甲酰胺、溴氰虫酰胺、四氯虫酰胺、氟苯虫酰胺）残留检测数据,选取检出率最高的氯虫苯甲酰胺为对象,探究其对蜂王幼虫生长发育的影响,为科学合理的规避化学农药对蜜蜂的潜在风险提供理论基础。主要研究结果如下:1蜂花粉等基质中4种双酰胺类杀虫剂多残留分析方法的确证建立了蜂花粉、蜂蜜、蜂粮和蜂王浆中氯虫苯甲酰胺等4种供试双酰胺类杀虫剂的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）分析方法。方法的线性范围为5-500ng/m L,相关系数为0.9902-0.9992,检测方法的定量限为1 ng/g;在10-1000 ng/g的添加浓度下,4种双酰胺类杀虫剂的平均添加回收率为65.4-117.6%,相对标准偏差为0.9-12.9%。结果表明,该方法可满足蜂花粉、蜂蜜、蜂粮和蜂王浆基质中氯虫苯甲酰胺等4种双酰胺类杀虫剂多残留分析的要求。2蜂花粉等实际样品中4种双酰胺类杀虫剂的残留检测应用已建立的蜂花粉等基质中4种供试双酰胺类杀虫剂的多残留检测方法,对连续两年采集的617份实际样品检测结果分析发现,蜂花粉样品中4种双酰胺类杀虫剂均有检出,检出率为0.83-52.89%,残留中值为1.80-32.70 ng/g;蜂蜜样品中只检出氯虫苯甲酰胺,检出率为19.83%,残留中值为7.60 ng/g;蜂粮样品中检出3种双酰胺类杀虫剂,四氯虫酰胺未检出,检出率为1.50-35.50%,残留中值为4.30-12.40 ng/g;蜂王浆样品中检出氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺,检出率分别为15.62%和10.94%,残留中值分别为0.64 ng/g和4.85 ng/g。其中,4种蜂产品实际样品中氯虫苯甲酰胺的检出率均为最高,残留浓度也相对较高。3氯虫苯甲酰胺对蜂王幼虫生长发育的影响选取蜂王浆中检出率最高的氯虫苯甲酰胺作为供试药剂,探究其对蜂王幼虫生长发育的影响。结果表明,当蜂王浆中氯虫苯甲酰胺剂量为2 ng/bee时,蜂王幼虫出房率与对照组相比有显著下降（P＜0.05）,比对照组降低了20.03%;当氯虫苯甲酰胺剂量为10 ng/bee和20 ng/bee时,幼虫出房率分别为38.11%和34.47%,比对照组降低了50%以上。蜂王初生重、头重、胸重和腹重在不同试验组之间差异不显著。4氯虫苯甲酰胺对蜂王幼虫和蛹体内保幼激素水平的影响利用UPLC-MS/MS方法测定不同剂量氯虫苯甲酰胺处理后蜂王幼虫和蛹体内保幼激素水平,结果表明,蜂王幼虫期处理组保幼激素滴度均比对照组低,20 ng/bee时影响显著,比对照组降低了72.38%（P＜0.05）;在蛹期,处理组保幼激素滴度均比对照组高,1 ng/bee时激素滴度最高,比对照组增加了60.47%（P＜0.05）,随着剂量的增大激素水平波动降低。5氯虫苯甲酰胺对蜂王幼虫体内3种解毒酶活性的影响氯虫苯甲酰胺处理后,蜂王幼虫体内谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、羧酸酯酶（Car E）和细胞色素P450（CYP450）不同程度被激活。其中GSTs在2 ng/bee时活性最大,为对照组的1.18倍;Car E活性和CYP450含量均在1 ng/bee时被激活的程度最大,分别为对照组的1.44、1.65倍。随着剂量的增大,解毒酶的活性和含量均出现下降趋势,但变化程度有差异。GSTs、Car E和CYP450作为昆虫体内重要3大解毒酶系,共同协作来调控氯虫苯甲酰胺的代谢过程。
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