论文部分内容阅读
氮素营养对于林木的生长至关重要,是有机体最主要的组成物质之一,因此土壤中的氮素营养也成为林木生长发育的主要限制因素之一。同时由于粮食安全对国家繁荣与稳定具有举足轻重的地位,因此肥力较好的土壤一般用于农业生产,营造人工林往往选择肥力相对较弱的区域,另外人工林也无法像农作物一样,进行定期施肥,因此提高林木在贫瘠土壤中的氮素吸收与利用效率,对促进林木在贫瘠土壤上的生长具有重要意义。AMT是植物体内铵吸收和转移的重要的转运子,主要从事根部对于环境中铵的吸收和转运以及地上部分铵的重吸收。本试验对毛果杨铵转运蛋白家族成员PtrAkT1;6基因进行了表达模式、功能鉴定和遗传转化等研究,结果如下:(1)荧光定量PCR结果显示:PtrAMT1;6基因偏好在叶片中表达,并且在成熟叶片中的表达显著高于幼嫩叶片;对毛果杨PtrAMT1;6基因进行光周期定量,结果显示,PtrAMT1;6基因具有黑暗诱导和光抑制的表达模式:(2)酵母铵转运蛋白突变体31019b突变体功能恢复试验结果表明,PtrAMT1;6基因恢复了突变体高亲和力铵转运的能力;(3)用pCAMBIA-PtrAMT1;6P转化拟南芥,并对转化系进行GUS染色,试验表明:转化株的根茎连接部、子叶叶柄以及靠近叶柄的叶脉和叶肉可以被X-Gluc染成蓝色,这表明PtrAMT1;6基因的启动子具有启动子活性;(4)pROKE2-PtrAMT1;6转化拟南芥并筛选纯合子,通过幼苗在不同培养基上的生长试验结果表明,PtrAM1;6基因在根中不发挥明显作用;(5)利用pROKE2-PtrAMT1;6载体遗传转化,创建84K杨过表达株系和抑制株系,经过分子验证得到13株过表达转化系和5株抑制系。以上结果表明,PtrAMT1;6可能参与地上部分氮代谢过程中的氨回收,通过创建的过表达与抑制表达株系,将为进一步明确这一结论,确定PtrAMT1:6其功能奠定基础。