传统大孔树脂色谱分离中药有效成分通常伴随着树脂利用率低、流动相用量大和生产周期长等问题。本研究以世界植物药中最具影响力之一的银杏叶为原料,基于饱和吸附法构建了一套连续色谱装置制备分离符合药典要求的银杏提取物工艺过程,为后续连续色谱装置广泛应用奠定坚实基础,其主要研究内容分为以下五部分:1.通过对D101、ADS-17、X-5、AB-8、DM-130、S-8等6种型号树脂进行静态和动态吸附解吸特性研究,选定ADS-17型号大孔树脂对银杏总黄酮具有较高的吸附和解吸效果。以银杏总黄酮吸附率和解吸率为指标,对ADS-17型号树脂进行制备分离银杏提取物工艺研究,得到最佳工艺条件为:上样总黄酮浓度为3.15 mg/mL,洗脱剂乙醇体积分数为70%,pH值为5.0,上样体积为5 BV、除杂体积为3 BV、解吸体积为3 BV,上样流速为2 BV/h、除杂流速为2 BV/h、解吸流速为2 BV/h,在此工艺条件下,获得的银杏提取物中总黄酮和内酯含量分别由制备分离前的2.71%和0.72%提高至30.28%和6.83%,总黄酮和内酯回收率分别为82.30%和78.32%。2.由于传统工艺大孔树脂制备银杏提取物存在着树脂利用率低、流动相用量大等问题,本文提出树脂基于饱和吸附分离制备银杏提取物的方法,对ADS-17型号大孔树脂进行饱和吸附实验结果表明:ADS-17型号大孔树脂饱和吸附时,每g树脂吸附生药材量可达2.72~3.28倍重量的生药材中的银杏总黄酮和内酯。与1 g树脂吸附1倍重量的生药材中的银杏总黄酮和内酯的传统吸附法比较,其树脂用量减少了2/3,极大的提高树脂利用率。ADS-17型号大孔树脂经饱和吸附后,洗脱下来的银杏提取物中总黄酮和内酯含量均符合国家药典标准。3.基于单柱树脂饱和吸附实验得到的结果,实验室自主研制连续色谱装置。核心是将原来的单根树脂柱切割为三根树脂柱,首尾串联固定于圆盘。自主研制的连续色谱装置主要由12个储液罐、6台流体泵、18根树脂柱、1个逻辑控制阀及1个软件控制系统构成,其中6台流体泵用于6种流入液体的输送;18根树脂柱被分为6个区用于样品吸附、水洗除杂、醇洗除杂、解吸、再生、水洗平衡;12个储液罐用于存储各流入和流出液体;1个软件控制系统控制流体泵和逻辑控制阀来实现中药有效成分的连续性制备分离。4.通过对实验室自主研发的连续色谱原理样机(Φ5.1 cm×30.0 cm)进行单吸附区、双吸附区、三吸附区连续色谱制备分离银杏提取物的工艺研究,获得符合药典要求的银杏提取物最佳工艺条件:A-上样流速45 mL/min、B-上样流速45 mL/min、C-上样流速45mL/min、水洗除杂流速36 mL/min、70%乙醇解吸流速36 mL/min、95%乙醇再生流速18 mL/min、水洗平衡流速18 mL/min、逻辑控制阀切换时间为20 min时,获取银杏提取物总黄酮和内酯含量分别为24.06~26.01%和6.06~7.01%,每千克树脂吸附2.58~3.11倍重量的生药材中的银杏总黄酮和内酯。5.通过线性放大连续色谱原理样机制备分离银杏提取物的工艺用于连续色谱生产装置(Φ80.0 cm×2.0 m)制备生产银杏提取物工艺研究。获得制备生产银杏提取物的最优工艺条件:A-上样流速1500L/h、B-上样流速1500L/h、C-上样流速1500L/h、水洗除杂流速1200 L/h、70%乙醇解吸流速1260L/h、95%乙醇再生流速600L/h、水洗平衡流速600L/h、逻辑控制阀切换时间为1 h时,获取银杏提取物总黄酮和内酯含量分别为24.33~26.01%和6.18~7.01%,每吨树脂吸附2.87~3.13倍重量的生药材中的银杏总黄酮和内酯。实验室自主研制的连续色谱装置不仅能够运用于银杏提取物制备分离,还可应用于其他中药有效成分制备分离,在中药有效成分制备分离中具有广泛应用前景,为中药有效成分制备分离提供新思路。