廿烷五烯酸协同吉西他滨体外诱导人肺癌A-549细胞凋亡

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目的:观察廿烷五烯酸联合吉西他滨对人肺癌A-549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及其与吉西他滨联用的协同效应,在临床为减少吉西他滨用药剂量继而减少毒副反应提供实验依据。方法:应用MTT比色法测定廿烷五烯酸及廿烷五烯酸联合吉西他滨对人肺癌A-549细胞株的抗增殖作用。应用倒置显微镜观察法、HE染色光学显微镜观察法、AO/EB双染色荧光显微镜观察法检测人肺癌A-549细胞凋亡形态学变化。应用流式细胞术观察了廿烷五烯酸对细胞周期的影响。结果:(1)MTT观察法结果表明:廿烷五烯酸及廿烷五烯酸联合吉西他滨对人肺癌A-549细胞株均有明显生长抑制作用,并表现出浓度、时间依赖性关系。(2)形态学观察:倒置显微镜观察到实验组A-549肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱。HE染色光学显微镜观察到了实验组细胞质脱水浓缩,体积变小,伊红染色增强,可见凋亡小体等典型的细胞形态学变化;AO/EB双染色荧光显微镜观察到实验组A-549肺癌细胞呈橘红色,细胞周围可见凋亡小体,呈绿色荧光的。(3)流式细胞仪检测结果发现EPA可以诱导肺癌A-549细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰,并且S期细胞比例显著增加(P<0.05),而G0,/G1期和G2/M期细胞比例则明显下降(P<0.05或P<0.01),将细胞阻滞在S期结论:1.廿烷五烯酸对人肺癌A-549细胞有抗增殖作用,并呈浓度和时间依赖性。2.廿烷五烯酸与吉西他滨有协同作用,并呈浓度和时间依赖性。3.廿烷五烯酸诱导A-549细胞凋亡,其诱导凋亡作用与S期阻滞有关。
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