鳜鱼是我国重要的一种经济食用鱼类，并且主要是以养殖为主。但是，近十年来传染性脾肾坏死病毒（infectious spleen and kidney necrosis virus，ISKNV）对鳜鱼的养殖业造成了严重的危害以及产生了较重的经济损失。为了获得抗ISKNV病毒的方法，本实验室以宿主（鳜鱼）与病毒的基因的相互作用为出发点，通过构建ISKNV感染鳜鱼的抑制性消减杂交cDNA的文库，成功发现并最终获得了鳜鱼caspase3基因的序列，本论文以此序列（caspase3）为出发点展开研究。 虽然通过序列比对，所获得的caspase3的基因序列与人的caspase3的基因序列相似度较大。但为了进一步验证鳜鱼caspase3基因同人类的caspase3基因一样，具有促凋亡的作用，本论文成功构建了pEGFP—Caspase3（鳜鱼）质粒，并转染到Hela细胞中表达，通过Hoechst/PI双染色法检测细胞的凋亡情况，结果发现转入并成功表达了caspasc3的细胞与对照组相比有明显的凋亡现象发生。因此，验证了鳜鱼的caspase3同样具有促凋亡的作用。 进一步确证caspase3的促凋亡功能，本论文构建了pCDNA—Gui—Caspase3和pCDNA—Ren—Caspase3两个质粒，转染到hela细胞中，通过PI/Annexin V双染，利用流式细胞技术，进一步证实了鳜鱼Caspase3的促凋亡作用。 通过对鳜鱼进行攻毒实验，运用实时定量PCR技术，验证了caspase3的表达量确实是与ISKNV感染相关的。在感染最初的时候（0h—4d），头肾、后肾、脾和血中的caspase3的表达量都没有太大变化或是略有下降，而在感染中期的时候（4 d），头肾、后肾、脾和血中的caspase3的表达量都发生了显著的增加。到了感染的后期（10 d），caspase3在后肾和血液中的表达量依然比较高，而头肾和脾中，caspase3的表达量就与初始水平相差不多了。 为了进一步探究病毒与caspase3的相互作用关系，也就是在病毒的作用下，是抑制caspase3的表达还是促进caspase3的表达，实验用ISKNV感染鳜鱼Fry细胞，通过实时定量PCR技术（Realtime—PCR），检测caspase3在感染下的表达情况。结果发现，虽然caspase3的表达量变化的波动较大，无明显的变化趋势，但是与对照组相比，表达量是降低的，也就是说，病毒在一定程度上抑制了caspase3的表达。