为了解氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因(armA, rmtA, rmtB,rmtC, rmtD和npmA)在河南地区鸡源大肠细菌中的流行状况,对2005~2007年在河南地区9地市发病鸡的病料分离保存的309株大肠杆菌进行药敏试验,并分别设计特异性引物对其进行16S rRNA甲基化酶基因的聚合酶链式反应扩增。在此基础上,为进一步探讨16S rRNA甲基化酶基因的扩散机制,并为养殖业合理使用氨基糖苷类药物,阻断耐药基因的扩散和新药研发提供依据,采用质粒接合试验和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分别从水平转移和垂直克隆传播两方面研究耐药基因的扩散机制。PCR检测结果显示,在2005~2007年发病鸡分离的309株大肠杆菌中,6种16S rRNA甲基化酶基因仅可检测到armA和rmtB,总检出率分别为4.5%(14/309)和18.8%(58/309)。提示河南地区发病鸡分离的大肠杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因产生率较高,且以armA和rmtB为主。armA和rmtB阳性菌对15种抗菌药物呈现多重耐药。接合试验采用大肠杆菌J53AzR作为受体菌,选取部分armA和rmtB阳性菌株作为供体菌,在含有叠氮钠和阿米卡星的胰蛋白胨大豆琼脂平面上筛选接合子,接合子由PCR检测鉴定。接合试验结果表明,部分armA和rmtB耐药基因可以通过接合性质粒的水平转移进行传播。PFGE分型结果表明,10株armA阳性菌分为2种基因型(A、B),38株rmtB阳性菌分为19种基因型(A-S),每一种基因型分别有1~8株菌,初步表明鸡源大肠杆菌armA和rmtB基因可以通过水平转移和垂直克隆传播两种方式进行扩散。