富含棕榈酸饮食对前列腺癌小鼠肿瘤生长及上皮间质转化的影响

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高脂饮食是前列腺癌发展的重要危险因素。棕榈酸是膳食脂肪酸中最常见的饱和脂肪酸,也是脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FASN)的主要终产物。已有许多研究表明,FASN在多种癌症中呈高表达,而FASN表达水平的增高会导致体内合成脂肪酸增多。有研究报道称,肿瘤细胞的增殖依赖于内源性的脂肪酸合成。然而,富含棕榈酸饮食对前列腺癌发生发展的影响少有报道。因此,本文旨在研究富含棕榈酸饮食在前列腺癌DU145细胞、前列腺癌移植瘤小鼠及c-Myc基因过表达(以下表述为c-MycT)原发性前列腺癌小鼠中对肿瘤生长及上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)等的影响。这些研究将为前列腺癌的缓解提供新思路。本文的主要研究成果如下:(1)通过检索TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库以及进行免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)染色比较前列腺癌组织及前列腺非癌组织标本中FASN表达的差异。结果表明,前列腺癌组织中FASN表达显著高于前列腺非癌组织(P<0.001)。Gleason评分高的前列腺癌组织标本中FASN呈显著高表达。(2)通过体外实验探究外源性棕榈酸对前列腺癌细胞DU145增殖、迁移的影响。采用MTT实验检测细胞增殖情况,结果显示10μM棕榈酸处理DU145细胞72 h能显著增强细胞的增殖能力(P<0.05)。通过克隆形成实验得出,10μM棕榈酸处理DU145细胞15天,与对照组相比形成更多的集落(P<0.05)。通过伤口愈合实验结果发现,10μM棕榈酸处理DU145细胞48 h能显著提高细胞的迁移能力(P<0.01)。(3)利用前列腺癌移植瘤裸鼠和c-MycT小鼠探究富含棕榈酸饮食对小鼠体内前列腺肿瘤生长及EMT进程的影响。通过分析前列腺肿瘤的生长情况,结果显示富含棕榈酸饮食可促进前列腺癌移植瘤生长并促进c-MycT小鼠前列腺肿瘤生长。通过IHC染色和western blot实验检测肿瘤组织中TGF-β1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白等EMT相关标志物的表达,结果得出富含棕榈酸饮食可诱导前列腺癌移植瘤和c-MycT小鼠前列腺癌的EMT进程和TGF-β1的表达。(4)通过检索TCGA数据库探究前列腺癌标本中CD36与TGF-β1之间的关系。采用Kaplan-Meier生存分析探究TGF-β1与前列腺癌患者生存率的关系,结果显示TGF-β1的表达与前列腺癌患者生存率降低有关(P=0.001)。通过基因相关性分析发现,CD 36表达与TGF-β1表达呈显著正相关(P<0.001)。通过单因素和多因素COX回归分析,结果表明TGF-β1、TGF-βRI和CD36是前列腺癌的危险因素(HR>1),其中TGF-β1是前列腺癌的独立危险因素(P<0.05)。综上所述,本文验证了FASN在前列腺癌中呈高表达,并提出FASN表达与前列腺癌的发展呈正相关。富含棕榈酸饮食能够促进前列腺癌移植瘤生长及c-MycT小鼠前列腺癌的发展,并诱导上皮间质转化过程,其机制可能与其上调TGF-β1的表达有关。这些研究为今后膳食指南提供一定的参考,即日常饮食中摄入棕榈酸要适量。
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