目的:　　1、分析金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌临床分离株的生物膜形成能力。　　2、研究Benzonase酶对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌生物膜的作用。　　3、研究抗菌药物与Benzonase酶联合作用对生物膜内活菌数量的影响。　　方法:　　1、刚果红琼脂(CRA)试验和黏附试验检测金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的生物膜形成能力，聚合酶链式反应(PCR)检测生物膜形成相关基因icaA。　　2、离心柱吸附法提取金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌生物膜内的胞外DNA(eDNA)，Benzonase酶消化后琼脂糖凝胶电泳观察。　　3、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌用胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养基培养24h后形成的生物膜，用含不同浓度Benzonase酶的TSB培养基继续培养24h分别进行如下处理:甲醇固定，结晶紫染色，冰醋酸溶解后检测其570nm处的吸光度值(OD570);平板菌落计数法检测生物膜内的活菌数;甲醇固定，结晶紫染色，光学显微镜下观察;干燥固定，喷金后扫描电镜下观察。　　4、微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对10种抗菌药物的敏感性，选取其中3种敏感的抗菌药物分别与Benzonase酶联合作用于菌株形成的生物膜，平板菌落计数法检测生物膜内的活菌数。　　结果:　　1、收集的29株金黄色葡萄球菌和23株表皮葡萄球菌临床分离株中，其中CRA试验阳性的菌株分别为19株和17株，黏附试验阳性的菌株也分别为19株和17株;PCR扩增检测icaA基因，金黄色葡萄球菌中有18株阳性，表皮葡萄球菌中有17株阳性。　　2、提取金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的eDNA，琼脂糖凝胶电泳分离后可见一条约15kb大小的条带;用Benzonase酶消化eDNA后，凝胶电泳未见条带。　　3、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌用TSB培养基培养24h后形成的生物膜，分别用不同浓度Benzonase酶的培养基继续培养24h后，其生物膜的含量和生物膜内的活菌数随着Benzonase酶浓度的升高而降低。当Benzonase酶的浓度分别超过0.2U/ml和0.02U/ml时，金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌生物膜的OD570值和生物膜内的活菌数下降不再发生变化。光镜和扫描电镜下观察不同浓度Benzonase酶处理的生物膜，其形态发生明显变化。　　4、庆大霉素、利福平、万古霉素分别与Benzonase酶联合作用金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌培养24h形成的生物膜，其生物膜内的活菌数下降程度比抗菌药物单独应用时明显(P＜0.05)。　　结论:　　1、从感染患者体液标本和分泌物标本中分离得到的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌中存在高比例的生物膜形成阳性菌株。　　2、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌生物膜中的eDNA通过DNA离心吸附柱方法分离得到的大小为15kb左右。　　3、极微量浓度的Benzonase酶就能将生物膜中的eDNA降解，破坏生物膜的稳定性结构，使生物膜的含量和生物膜内的活菌数大幅下降。　　4、抗菌药物与Benzonase酶同时作用于生物膜时，生物膜内的活菌数下降程度比抗菌药物单独使用时更加明显，但仍不能完全清除生物膜内的细菌。