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L-抗坏血酸(简称VC)在体内发挥着重要的生理作用,但其还原性强,极不稳定,这使得它在应用上受到了很大的限制.VC的衍生物则大大提高了它的稳定性,而不影响它的生理功能.该课题就其衍生物之一2-O-葡萄糖基抗坏血酸在糖基转移酶的作用下的生物合成及产物分离纯化作了较系统的研究.该课题以嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus.stearothermophilis)为出发菌株,通过单因素实验,初步确立了其产生糖基转移酶的培养基碳源为1％葡萄糖,氮源为0.5％蛋白胨,培养基装量为250ml三角瓶中装30ml,接种量为4％,培养基初始pH为8.0,培养温度为55℃.采用正交实验,得出生物转化反应的最佳条件为:以CMC-Na为葡萄糖基的供体,浓度为0.04mol/L VC作为受体,酶量是25mL,pH值4.0,温度60℃下反应16hr.采用紫外线诱变育种,筛选到一株酶转化能力提高了149.28％的菌株Z3104,使AA-2G含量达到了274.78mg/L.将Plackett-Burman法与响应面分析法相结合,利用origin软件优化菌种产酶条件,得最佳条件为:葡萄糖2％,蛋白胨0.6％,MgSO<,4>·7H<,2>O 0.01％,KH<,2>PO<,4>0.0625％,初始pH为7.15,48℃,200r/min培养48小时,在此条件下所产的酶转化得产物含量为375.24mg/L,比优化前提高了41.16％.最后,对B.stearothermophilis产酶发酵过程进行了发酵罐放大研究,使菌体产酶量和活力提高,转化后得到最高产物浓度达419.40mg/L.并对产物进行了初步分离提纯,确定采用A500P树脂,0.3mol/L盐酸洗脱效果较好.