论文部分内容阅读
本论文以小麦面筋蛋白为基础试验材料,经过美拉德反应和氧化反应修饰为异蛋白,模拟肉仔鸡消化道应激,以此研究应激对消化道结构和功能的影响及其机理,同时初步建立应激评价体系,并通过添加抗应激剂研究缓解消化道应激的技术。试验一高级糖基化终产物诱导的肉仔鸡消化道应激本试验旨在研究面筋蛋白AGE对肉仔鸡消化道结构和功能的影响。将180只肉公鸡分为3个处理,每个处理6个重复,每重复10只鸡。分别饲喂对照日粮(CON),原始面筋日粮(WG)和面筋蛋白AGE日粮(AGE)。结果表明,AGE处理组显著降低21日龄肉仔鸡BW,ADG和ADFI,并显著增加饲料转化率(P<0.05)。三个处理组中粪便pH值,粪便水分含量和回肠形态组织学并无显著差异。然而,AGE处理组的粗蛋白质表观消化率显著低于对照组的相应值(P<0.05)。对35日龄肉仔鸡而言,三个处理组中AGE处理组的BW最低,而FCR值最高。结论:面筋蛋白的美拉德反应产物降低肉仔鸡的生长性能。AGE是肉仔鸡消化道的一种应激源,会影响消化道的功能而并未改变肠道形态。试验二氧化面筋诱导的肉仔鸡消化道应激本研究旨在探讨氧化面筋对肉仔鸡消化道结构和功能的影响。将180只肉公鸡随机分为3个处理组,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂对照日粮(CON),原始面筋日粮(WG)和氧化面筋日粮(OG)。结果表明,氧化面筋日粮显著降低21日龄和35日龄肉仔鸡BW和ADG,并显著增加饲料转化率(P<0.05)。与对照组相比,氧化面筋处理组粪便pH值显著降低(P<0.05),粪便水分含量显著增加(P<0.05),试验动物表现出腹泻症状。三种处理日粮对肉仔鸡回肠形态结构无显著影响。与饲喂对照组日粮相比,饲喂OG处理日粮的肉仔鸡显著降低粗蛋白质的表观消化率(P<0.05)。结论:氧化面筋蛋白是肉仔鸡消化道应激源之一,造成肉仔鸡消化道处于应激状态,发生腹泻症状。氧化面筋会降低肉仔鸡的生长性能,可以诱导消化道功能的改变,但并未改变回肠组织结构。试验三肉仔鸡消化道应激生物标志物筛选本研究旨在筛选应激状态下肉仔鸡血清、嗉囊和回肠中生物标志物和组织中差异表达蛋白,用于更准确地预测或判定消化道的应激状态。将180只肉公鸡随机分为3个处理组,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂对照日粮(CON),原始面筋日粮(WG)和氧化面筋日粮(OG)。结果表明,消化道应激状态下,嗉囊和回肠组织中氧化还原平衡遭破坏,并表现出一定程度的炎症免疫状态,而血清中氧化状态和炎症状态并未受到应激状态的影响。除生长性能、粪便表观状态、粪便p H值、粪便水分含量、粗蛋白质表观消化率显著变化外,消化道组织中GSH、GSSG、GSH/GSSG、LPO、MDA、IL-10和TNF-α发生显著变化。蛋白质组学分析表明,消化道应激状态下嗉囊和回肠组织中m GST和PLA2表达量下调,抗菌肽1、抗菌肽2和IL-18表达量下调。结论:反映肉仔鸡消化道应激状态的生物标志物包括,生长性能、粪便表观评分、粪便pH值、粪便初水分含量、粗蛋白质表观消化率、消化道组织中氧化状态指标和炎症免疫状态指标。依据指标数据采集测定过程对肉仔鸡损伤程度、指标测定难易程度和价格信息,将生物标志物分为两个层级。试验四肉仔鸡消化道应激机理研究本研究利用iTRAQ方法以及质谱和软件分析,探索应激状态下消化道功能改变的原因和通路。将120只肉公鸡随机分为2个处理组,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂对照日粮(CON)和氧化面筋日粮(OG)。结果表明,肉仔鸡消化道组织中共鉴定出4385个蛋白质,其中对照组和应激组间共有76个蛋白差异化表达。其中53个蛋白表达量上调,23个蛋白表达量下调。KEGG代谢通路分析发现嗉囊和回肠组织中有1条代谢通路被显著性差异调控。结论:消化道应激状态下,上皮细胞的缝隙连接通路被显著性差异调控,调控细胞内水分和离子转运的功能失调,造成肉仔鸡腹泻。消化道上皮细胞收缩性的改变可能是诱导炎症反应的原因,发挥抗原递呈作用的蛋白质表达量上调,造成消化道中免疫状态激活,而具备清除过氧化物和脂质代谢产物功能的蛋白质表达量下调导致消化道中氧化还原平衡破坏。试验五维生素C对肉仔鸡消化道抗应激作用的研究本试验旨在研究维生素C缓解消化道应激状态的作用。将240只肉公鸡随机分为4个处理组,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂对照日粮(CON)、面筋日粮(WG),氧化面筋日粮(OG)和OG+0.4%维生素C日粮(AOG)。结果表明,与氧化面筋组相比,添加Vc处理组显著改善肉仔鸡粪便状态,显著提高粪便pH值,降低粪便中水分含量(P<0.05);同时,Vc日粮显著提高消化道应激后肉仔鸡的生长性能,和粗蛋白质表观消化率(P<0.05);与氧化面筋处理组相比,AOG处理组回肠中GSSG和MDA浓度显著降低(P<0.05)。结论:维生素C改善消化道应激状态下肉仔鸡消化道功能,从而缓解肉仔鸡消化道应激对生长性能的抑制作用。维生素C通过抑制消化道中的氧化应激,发挥其缓解由氧化面筋诱导的消化道应激的作用。