山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)的干燥成熟深红棕色果肉,经常作为糖尿病的治疗药物出现在中药制剂中,如六味地黄丸。医书里记载山茱萸有补益肝肾、收敛固涩的功效,临床上主要治疗腰酸膝软、滑精、崩漏、汗出不止及消渴等疾病,中医常用于治疗消渴(糖尿病)病。而莫诺苷是山茱萸中含量最高的环烯醚萜苷成分,可以通过抗氧化应激、抗炎、抗细胞凋亡来起到抗糖尿病作用。山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea opposite Thunb.)的干燥根茎,在中药复方里常被用作山茱萸的药对,起到抗糖尿病的作用。有益气养阴、补脾肺肾、固精止带的功效。而薯蓣皂苷元是山药中值得研究的甾体皂苷类成分,也是体内甾体皂苷的主要代谢物,它对心血管疾病和糖尿病有良好的疗效。因此,本文旨在研究山茱萸和山药配伍对糖尿病心肌病的治疗及保护作用,为以后糖尿病心肌病新药的研发奠定基础。本文主要分三个部分:第一部分:研究山茱萸-山药药对粗提物配伍对糖尿病小鼠心肌的保护作用。首先用高脂饲料喂养小鼠四周,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg,1周后测血糖,将血糖值>16.7mmol/L的小鼠视为造成2型糖尿病模型,每天灌胃给药1次,然后观察小鼠的体重、进食量、饮水量、血糖的变化,给药8周后取血和心脏,检测血清胰岛素水平和心肌组织SOD活力、MDA含量,再做心肌病理切片(HE染色、Masson染色、免疫组化)。结果显示配伍高剂量组能显著降低小鼠血糖,增强心肌组织SOD活力和MDA水平,促进了胰岛素分泌,也显著降低了心肌组织TGF-β1的表达。结论:山茱萸-山药药对粗提物配伍对糖尿病小鼠心肌有一定的保护作用。第二部分:体外建立高糖引起的心肌细胞损伤模型,来研究莫诺苷和薯蓣皂苷元配伍对心肌细胞的保护作用。通过MTT法、Tunel法、Annexin V-FITC/PI法、DCFH-DA法来研究莫诺苷-薯蓣皂苷元配伍对心肌细胞保护作用和凋亡的影响,运用Western Blotting来研究莫诺苷-薯蓣皂苷元配伍对心肌细胞蛋白表达的影响。结果显示在莫诺苷组(Mor)、薯蓣皂苷元组(Dio)和莫诺苷-薯蓣皂苷元配伍组(M+D)都增加了细胞活力、抑制了细胞凋亡、降低了 ROS水平;另外Bax和Bcl-2的蛋白表达被调节,caspase-3蛋白表达被抑制。在所有给药组之间,莫诺苷和薯蓣皂苷元配伍高剂量组产生了最突出的效果。结论:数据表明了莫诺苷-薯蓣皂苷元配伍可能通过降低氧化应激和细胞凋亡对高糖引起的心肌细胞损伤起到保护作用。第三部分:富集纯化山茱萸环烯醚萜苷有效部位并做指纹图谱研究采用大孔树脂纯化、富集山茱萸中的环烯醚萜苷成分,进一步用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取除杂,收集正丁醇层,结果进液相测得含量大于50%;然后研究了 10批山茱萸药材的环烯醚萜苷有效部位的指纹图谱,考察了制备方法的稳定性,以此作为山茱萸环烯醚萜苷有效部位质量控制和应用的参考依据。