抗结肠癌相关抗原Fab片段的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jsrlzxd111
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从抗结肠癌细胞系LS174T的单抗细胞株CL-4中提取总RNA,反转录形成cDNA.设计并合成了一套扩增鼠抗体重链可变区和完整k轻链的通用引物,通过PCR扩增得到了重链可变区和完整轻链基因.测序结果表明重链属于Mouse Heavy Chains Subgroup Ⅱ(B),轻链属于Mouse Kappa Light Chains V.过氧化物酶免疫组织化学SABC法检测复性Fab片段对正常大肠、正常胃、正常肝组织,胃印戒细胞癌、胃和大肠的高、中、低分化腺细胞癌,以及对胆管的高、低分化腺细胞癌石蜡切片的特异性反应,结果显示基因工程抗体Fab片段和原杂交瘤抗体一样,具有较高的特异性.
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