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理论研究临床上,高血压往往与糖脂代谢异常紧密联系,其与高血糖、高血脂三种疾病互相影响,互相促进,增加发生心脑血管疾病的患病危险和病死率。在治疗上,高血压合并糖脂代谢异常往往需要多种药物配合治疗。降糖药物多为格列酮类,是PPARγ激动剂,但对于肝脏具有一定的不良影响,并增加心衰的风险。他汀类为目前最有效最常用的降脂调脂药物,但长期服用带来的的肝损害及肌肉溶解作用,限制了该类药物的大剂量、长期应用。中医药治疗在中度或重度高血压患者的降压效果上并不令人满意。但在以下几个方面有其不可取代的优势,包括改善症状,提高生活质量；平稳降压,减少危险事件；保护靶器官,预防并发症；联用西药,减量减毒增效。有学者认为高血压糖脂代谢异常的病机痰湿为主,但经过课题组的不断研究发现高血压糖脂代谢异常的根本病机是肾虚,而心火、肝火、痰瘀互结为其标。其根本病机为肾虚主要有以下几点原因：肾藏精,为先天之本；肾主水,水饮痰浊其本为肾；由于生理性改变,五脏虚损,肾精亏虚,常表现为生理性肾虚证；肾虚是高血压糖脂代谢的发展阶段,长期的耗损均可导致肾精亏耗,累及肾阴、肾阳；服用西药药物的不良反应。这是肾的生理特性及疾病的特征共同决定的。另外临床上以补肾的同时兼以清心火、清肝火,活血化痰饮的治法临床观察得到了较满意的结果。且中药在改善患者临床症状上有明显效果,可显著提高患者生存质量。脂联素高度特异表达于脂肪细胞,可以增强脂肪酸的氧化和葡萄糖的摄取,具有增强胰岛素敏感性、抗炎、保护血管内皮细胞等作用。它可通过多条信号通路参与细胞的能量代谢,并可与胰岛素信号通路相互作用,共同参与机体糖脂代谢及血压的调节。AdipoR1和AdipoR2是脂联素的受体。人体多种组织细胞表面均有脂联素受体的分布和表达通过AdipoR1,APPL和AMPK得以激活,而PPAR是由AdipoR2激活的。另外,Ca2+和SIRT1新近也被发现是脂联素受体的效应因子,强效的神经酰胺和ROS同样会影响脂联素及其受体的诱导作用。实验研究基于补肾治则治法形成的“补肾降压方”是导师王阶教授的经验方,由生地、天麻、杜仲、三七等药物组成。研究发现,该方不仅能有效降压,而且能有效缓解临床症状,改善肾虚证,改善合并病,提高患者服药依从性。因此,为了进一步明确“补肾降压方”对高血压糖脂代谢异常的作用靶点,本实验旨在探讨补肾降压方对高血压伴糖脂代谢异常大鼠血压及糖脂代谢的影响及其基因调控机制。目的：观察补肾降压方对自发性高血压伴糖脂代谢异常大鼠血压,血糖,血脂,心脏形态的影响,并初步探讨其对脂联素通路的影响。方法：选用健康清洁级5周龄自发性高血压大鼠(SHR)40只,随机分为正常饮食组和高糖高脂组。8周造模后将高糖高脂组大鼠分为三组：模型组(空白SHR大鼠伴糖脂代谢异常),卡托组(卡托普利)和补肾组(补肾降压方)。连续用药8周。每周测血压1次,每两周测血糖一次,治疗8周后处死大鼠。检测血糖,血脂,胰岛素。心肌组织切片行HE染色观察心脏组织病理形态学改变。Elisa法检测血清中ADP的含量。实时定量PCR检测PPARα, CPT-1,PI3K,Akt及eNOS基因表达,包括步骤RNA制备,RNA反转录,荧光定量检测。Western blot检测心脏组织AdipoRl, AdipoR2, APPL1, AMPK, pAMPK, p38MAPK, PPARα蛋白表达,包括步骤蛋白抽提,BCA法蛋白定量,蛋白浓度调整。实验结果以表示各组间差异比较,采用单因素方差分析,全部资料用SPSS 18.0进行统计分析。结果：血压：给药前各组喂食高糖高脂模型的SHR大鼠血压无统计学差异(P>0.05),且血压高于普通饲料喂养的SHR大鼠(P<0.05),说明模型建立。给药4周后,与模型组大鼠比较,卡托组降压明显(P<0.05)。给药8周后,卡托组及补肾组分别与模型组比较,血压均有统计学意义(P<0.01)。卡托组与补肾组比较,差异无统计学意义。血糖血脂：给药前各组喂食高糖高脂模型的SHR大鼠血糖无统计学差异(P>0.05),且血糖高于普通饲料喂养的SHR大鼠(P<0.05),说明模型建立。给药8周后,卡托组与补肾组均与模型组大鼠比较,卡托组有降低血糖的趋势,但并无显著性差异(P>0.05),而补肾组与模型组结果相似。心肌组织病理学：光镜下观察可见：SHR大鼠心肌纤维增厚,屈曲,边界已显模糊；模型组大鼠心肌纤维肿胀、断裂、排列紊乱,边界不清,胞核不均,细胞间连接疏松,可见局部炎症细胞浸润,且有局灶性坏死,并有粥样斑块；卡托组大鼠上述情况明显减轻,接近正常；补肾+高糖脂SHR大鼠心肌组织得到改善。PCR检测大鼠心脏组织PPARα、肝脏组织PPARα及血管组织PI3K, Akt及eNOSmRNA表达：(1)肝脏PPAR-αmRNA表达中,各组间比较符合方差齐性标准(F=3.519)。与SHR组相比,模型组升高趋势,但并无显著性差异；卡托组与补肾组皆有降低趋势(P>0.1,P=0.052)。与模型组相比,卡托组和补肾组皆有降低,其中补肾组有显著性差异(P=0.053,P<0.01)。与卡托组相比,补肾组有降低趋势,但无显著性差异(P>0.1)心脏PPAR-αmRNA表达中,各组间比较符合方差齐性标准(F=18.508)。与SHR组比较,模型组,卡托组和补肾组都有所升高,皆有显著性差异(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,卡托组和补肾组皆有所降低,其中卡托组有显著性差异(P<0.05)。与卡托组相比,补肾组有升高趋势,但无显著性差异(P>0.1)。(2) PBKmRNA表达中,各组间比较符合方差齐性标准(F=21.030)。与SHR组相比,模型组有显著性降低(P<0.01),卡托组有显著性升高(P<0.01),补肾组并无显著性差异。与模型组相比,卡托组与补肾组有所升高(P<0.01,P=0.058)。与卡托组相比,补肾组有显著性差异(P<0.01)。(3) AktmRNA表达中,各组间比较符合方差齐性标准(F=21.191)。与SHR组相比较,模型组、卡托组与补肾组皆有显著性降低(P<0.01)。与模型组比较,卡托组和补肾组皆有显著性升高(P<0.01,P<0.05)。与卡托组比较,补肾组并无显著性差异(P>0.1)。(4) eNOSmRNA表达中,各组间比较符合方差齐性标准(F=21.191)。与SHR组相比较,模型组、卡托组皆有显著性降低(P<0.01)。与模型组比较,卡托组和补肾组皆有显著性升高(P<0.01,P<0.05)。与卡托组比较,补肾组有显著性降低(P<0.01)。Western blot检测大鼠心脏组织AdipoRl、AdipoR2、APPL1、AMPK,pAMPK,MAPKp38, PPARa蛋白表达：(1)在AdipoRl蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=3.186)。与SHR组相比,模型组,卡托组,补肾组均有升高,其中模型组有显著性差异(P<0.01),卡托组与补肾组无显著性差异(P--0.091,P>0.1)。与模型组相比,卡托组与补肾组有降低趋势,但无显著性差异(P>0.1)。与卡托组比较,补肾组基本持平,无显著性差异(P>0.1)。(2)在AdipoR2蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=3.365)。与SHR组相比,模型组,卡托组,补肾组均有升高,其中模型组和卡托组有显著性差异(P<0.05)。与模型组和卡托组相比,补肾组有降低趋势,但无显著性差异(P>0.1)。(3)在APPL1蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=3.716)。与SHR组相比,模型组,卡托组有所升高,呈显著性差异(P<0.05,P<0.01),补肾组也有升高(P=0.66)。与模型组相比,卡托组有升高的趋势,补肾组与模型组相当,但皆无显著性差异(P>0.1)。与卡托组比较,补肾组有一定降低趋势,但无显著性差异(P>0.1)。(4)在AMPK2a蛋白表达的比较中,各组间比较符合(F=0.165)。四组比较并无较明显的升高降低趋势,也无显著性差异(P>0.1)。在pAMPK-2a蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=1.488)。与SHR组相比,模型组与卡托组均有升高,但并无显著性差异(P>0.1,P=0.92)。与模型组相比,卡托组和补肾组有降低的趋势,但并无显著性差异(P>0.1,P=0.75)。与卡托组比较,补肾组有降低趋势,但并无显著性差异(P>0.1)。(5)在MAPKp38蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=10.251)。与SHR组相比,模型组,卡托组,补肾组均有降低,有显著性差异(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,卡托组有降低趋势,补肾组皆有升高趋势,但并无显著性差异(P>0.1)。与卡托组比较,补肾组有所升高,有显著性差异(P<0.05)。(6)在PPARa蛋白表达的比较中,各组间比较符合方差齐性标准(F=1.796)。与SHR组相比,模型组,卡托组,补肾组均有升高趋势,其中卡托组有显著性差异(P<0.05)。与模型组相比,卡托组有升高趋势,但无显著性差异(P>0.1)。与卡托组比较,补肾组有降低趋势,但无显著性差异(P>0.1)。结论：(1)补肾降压方能稳定降低高血压伴糖脂代谢异常的血压,改善血脂,并不影响血糖。(2)补肾降压方能一定程度减轻高血压伴糖脂代谢异常心肌病理学改变。(3)高糖高脂合并高血压状态较单纯高血压状态,以下基因表达出现变化：PPARamRNA表达升高,PI3KmRNA, AktmRNA, eNOSmRNA表达降低。而补肾降压方与PPARamRNA表达降低,PBKmRNA, AktmRNA, eNOSmRNA表达升高相关联。(4)高糖高脂合并高血压状态较单纯高血压状态,以下蛋白表达出现变化：AdipoR1, AdipoR2, APPL1, p-AMPK2a, PPARα表达升高,MAPKp38表达降低。而补肾降压方与AdipoR1, AdipoR2, APPL1, p-AMPK2α, PPARα表达降低,MAPKp38表达升高相关联。(5)补肾降压方对SHR伴糖脂代谢异常心脏具有一定保护作用,其作用很有可能通过调节脂联素通路实现的。