耐热真菌的分类及分子系统学研究

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耐热真菌(thermotolerant fungi)是一类最高生长温度在50℃左右(通常为40℃或40℃以上),最低生长温度在20℃以下的特殊真菌类群,在高温条件下表现出独特的生存适应能力。随着人们对高温生命形式奥秘的揭示,耐热微生物的研究已成为国际研究的热门领域。目前世界上已描述和报道的耐热真菌有89种,我国已报道的有23种。   在本研究中,分别从我国12个省采集标本600多份,经分离鉴定,共描述耐热真菌28种,分别为:   接合菌门Zygomycota:伞状犁头霉Absidia corymbifera、刺孢小克银汉霉Cunninghamella echinulata、卵形孢球托霉Gongronella butleri、卷枝毛霉Mucor circinelloides。   子囊菌门Ascomycota:金色毛壳Chaetomium aureum、瘤孢棒囊孢壳Corynascus sepedonium、小孢梭孢壳Thielavia microspora、沙生梭孢壳Thielavia arenaria、栖土梭孢壳Thielavia terricola、粪生粪壳菌Sordariafimicola、爪哇正青霉Eupenicillium javanicum、宛氏拟青霉Paecilomycesvariotii、绳状青霉Penicillium funiculosum、费氏曲霉Aspergillusfischerianus、黄曲霉Aspergillus flavus、米曲霉Aspergillus oryzae、黑曲霉Aspergillus niger、塔宾曲霉Aspergillus tubingensis、土曲霉Aspergillusterreus、焦曲霉Aspergillus ustus、新月弯孢Curvularia lunata、嘴突突脐蠕孢Exserohilum rostratum、棕黑腐殖霉Humicola fuscoatra、尖端赛多孢子菌Scedosporium apiospermum、瓶孢带孢霉Taeniolella phialosperma、长枝木霉Trichoderma longibrachiatum、丰孢木霉Trichoderma saturnisporum。   担子菌门Basidiomycota:黄孢原毛平革菌Phanerochaetechrysosporium。   其中,沙生梭孢壳Thielavia arenaria和丰孢木霉Trichodermasaturnisporum为中国新纪录种。   本研究在形态分类的基础上,对所分离鉴定的28种耐热真菌及购买的6株耐热真菌,进行5.8S rDNA-ITS序列和Mn-SOD中间片段序列测定和分子系统学研究。所测片段长度分别为554-895bp和414-490bp。通过与GenBank中的Mn-SOD序列进行比对,推断出了其编码的氨基酸序列,其中有7个菌株有50-70bp内含子。通过序列分析表明,5.8S rDNA-ITS序列能有效区分大多数隶属不同属、种的耐热真菌,序列同属不同种间相似性明显大于属间相似性;Mn-SOD氨基酸序列显示出高度保守性,其保守序列有:NHHQTYV、GGGH、QGSGW、WEHAYY。   基于5.8S rDNA-ITS序列构建的系统发育树,较好的显示了耐热真菌的系统进化关系,有力地支持了形态学的观点。基于Mn-SOD中间片段氨基酸序列构建系统发育树,与前者差异较大,没有反映出与形态学对应的系统进化关系,有待进一步研究。
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