人促甲状腺素受体真核表达载体的构建及鉴定

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cangyueshang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:构建人促甲状腺激素受体(hTSHR)真核表达载体pcDNA3.1/hTSHR,为构建甲状腺相关眼病的动物模型奠定基础。 方法:采用RT-PCR的方法从人正常甲状腺组织总RNA中扩增目的片段hTSHR,将纯化的扩增产物与表达载体pcDNA3.1(+)分别双酶切后连接,转化至E.coli DHt5α感受态菌中。得到的重组质粒经PCR、双酶切和核苷酸序列测定方法进行鉴定。 结果:PCR扩增得到hTSHR与预期大小一致、约2300bp的特异性DNA片段。该片段与表达载体pcDNA3.1(+)双酶切后连接得到重组质粒pcDNA3.1/hTSHR,经PCR、双酶切和核苷酸序列测定方法鉴定证实hTSHR片段插入序列和方向正确。 结论:成功构建hTSHR真核表达载体pcDNA3.1/hTSHR,可用于后续基因表达。
其他文献
目的:糖尿病性脑血管病是近年来提出的新概念,是指由糖尿病所并发的脑血管病,在糖、脂肪、蛋白质等一系列代谢紊乱的基础上,所发生的颅内大血管和微血管的病变。临床上可表现为缺
前言急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)主要的发病机制是不稳定性粥样斑块破裂或其表面破损,继发血栓形成,引起冠状动脉急性完全或不完全闭塞,从而导致急性心肌缺
目的:  探讨鼠诺如病毒(Murine norovirus,MNV)是否在新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing Enterocolitis,NEC)新生小鼠模型中起保护作用,并分析其可能的作用机制。  方法:将75只
目的胎盘滋养细胞的浸润是细胞—细胞、细胞—基质间相互作用的机能变化,这一过程发生细胞外基质(ECM)成分的变化,受到细胞因子、生长因子、粘附分子、蛋白酶类和激素等多种
目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病危害最大的微血管并发症之一,流行病学研究表明,在美国,终末期肾脏病(ESRD)约1/3为糖尿病所致,且75%为2型糖尿病,我国约为5%。该病