背景和目的胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。虽然在全球的胃癌发病率逐步下降,但其仍位居世界常见恶性肿瘤第4位,死亡率仍居高不下,占恶性肿瘤第2位。这主要是由于早期诊断率低(I期仅占10%)、手术切除低(根治切除占50%～65%)、5年生存率低(总体生存率仅30%左右)。外科手术彻底切除癌灶仍是根治胃癌的最主要手段,但是胃癌术后复发率高达50 %～70 % , 5年生存率只有20 %～50 % ,故人们一直在寻求手术以外治疗胃癌的方法以改善胃癌患者的预后。自20世纪60年代以来,化疗开始应用于胃癌,此后化疗药物及方案“此起彼伏”,主要由于胃癌对大多化疗药物呈低敏感性,患者化疗的效果较差,而且胃癌细胞存在异质性,使个体化疗效果存在较大差异,难以却得较满意的疗效。因此,近年来从化疗用药的选择、组合、剂量以及用法进行改进和尝试,以期望提高化疗疗效、降低毒副作用,成为胃癌化疗的研究热点之一。本研究的目的是通过观察11种临床常用化疗药物对人胃癌细胞株MGC-803的敏感性,以筛选较敏感的药物,并研究其不同给药顺序对MGC-803细胞株的抑制作用,以探究敏感药物可能的最佳序贯化疗方案。方法将人胃癌细胞株MGC-803接种于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中,进行常规培养。1、绘制生长曲线:用MTT法检测MGC-803细胞株的增殖情况,并绘制出不同密度细胞的标准生长曲线。并根据各浓度细胞生长情况,选定合适的细胞浓度作为试验初始接种密度。2、敏感药物筛选试验:检测11种临床常用化疗药物在不同浓度不同时间点(24h、48h、72h)对人胃癌细胞株MGC-803的抑制作用,以筛选较敏感的药物。并绘制出敏感药物对MGC-803细胞生长抑制的时-效、量-效曲线。3、敏感药物序贯用药试验:通过上一步试验筛选的结果,我们选择敏感药物作用24 h后肿瘤细胞生长抑制率在20%～25%左右的药物浓度进行序贯给药试验(选定DDP的给药浓度为50%TDC, DOC的给药浓度为6.25%TDC )。结果1、在倒置相差显微镜下,观察肿瘤细胞的一般形态:部分敏感化疗药物对MGC-803细胞有明显抑制增殖作用。随着的浓度增加和作用时间延长肿瘤细胞的数目和形态都有所改变。2、MGC-803的生长曲线显示随着细胞浓度和培养时间的增加,吸光度值(OD值)逐渐增高。在72小时之内,细胞初始接种密度为1×104-4×104/ml时,细胞呈良好的线性关系生长,本试验选定2×104/ml作为细胞初始接种密度。3、人胃癌MGC-803细胞对不同化疗药物敏感性存在明显差异。11中化疗药物中,敏感性自高到低依次为多西紫杉醇(DOC)、紫杉醇(PTX)、氟脲嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、长春地辛(VDS)、表阿霉素(EPI)、奥沙利铂(L-OHP)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)和足叶乙甙(VP-16)。4、单用DDP组、单用DOC组、DDP+DOC组、DDP→DOC组、DOC→DDP组对MGC-803细胞的生长抑制率分别为27.12%、30.06%、31.32%、30.26%、36.14%。其中,DOC→DDP组序贯给药方案对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用最强,与其他4种给药方案相比差异皆有统计学意义(P<0.05)。但DDP→DOC组和DOC+DDP组两种给药方案间比较差异无统计学意义(P=0.863>0.05)。两单药组给药方案见间比较差异亦无统计学意义(P=0.533>0.05)。结论1、人胃癌MGC-803细胞对不同化疗药物具有不同的敏感性。2、DOC、PTX、5-FU、DDP单药对MGC-803细胞株有相对较强的抑制增殖作用。3、先予DOC再予DDP作用于MGC-803细胞株可能是两者抑制细胞增殖最佳序贯给药方案。4、胃癌序贯给药化疗方案在药物联合、给药顺序、剂量及给药途径上值得进一步研究。