黄花苜蓿苗期耐旱性鉴定及相关基因表达分析

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本试验以新疆野生黄花苜蓿为材料,利用甘露醇和PEG-6000两种试剂进行干旱胁迫处理,研究黄花苜蓿干旱胁迫下幼苗的发芽情况以及干旱胁迫对黄花苜蓿形态及生理指标的影响,筛选黄花苜蓿耐旱敏感点,并利用转录组测序结果,筛选植株在PEG-6000胁迫下的差异表达基因,用q PCR对相关基因进行验证,为苜蓿资源鉴定利用与保护、抗旱鉴定的方法和资源筛选鉴定提供一定理论依据和技术支持,为开展苜蓿耐旱性遗传育种研究奠定基础。主要结果如下:(1)甘露醇胁迫处理下黄花苜蓿在1/2MS培养基中种子萌发率最高,达到85%以上;根长最长为6.14 cm,鲜重最重为0.063 g;随着甘露醇浓度的增加,种子萌发率、根长以及鲜重都呈现逐渐下降趋势。(2)用0%、10%、20%、30%、40%PEG-6000处理黄花苜蓿40 d苗期的植株,确定30%PEG-6000处理60 min作为敏感点。干旱胁迫下黄花苜蓿的根、叶片中的SOD、POD、CAT活性、电导率以及可溶性糖含量较对照有所增加,复水处理60 min后上述生理指标均低于胁迫处理;根中的SOD活性、电导率和可溶性糖含量高于叶片中的含量,叶片中POD和CAT活性高于根中的含量。(3)利用转录组测序技术,筛选出10个可能与抗旱相关的基因,选用Actin和UBL-2a基因作为内参,进行q PCR验证,结果显示10个基因中9个基因表达趋势均与转录组数组一致,证明转录组数据可靠。
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