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背景与目的:胰腺神经内分泌瘤(Pancreatic Neuroendocrine Tumors,PNETs)是我国最常见的神经内分泌瘤类型。虽然PNETs发病率并不高,但因其前期症状隐匿,能及时发现并接受早期手术治疗的患者很少,而后期常伴有肝脏及其他部位转移,外科治疗效果不佳,而PNETs对放、化疗治疗不敏感。PNETs是一种富血管的肿瘤,血管生成在其发生发展中起到了非常重要的作用,抗血管生成逐渐成为其重要的治疗策略之一。分子靶向药物舒尼替尼已被批准用于PNETs的治疗。但临床观察显示,患者使用舒尼替尼,在获得短暂受益后,往往出现耐药,肿瘤侵袭能力反而增强,更易发生转移,提示有必要寻找新的抗血管生成靶点。神经纤毛蛋白2(neuropilin2,NRP2)可表达于黑色素瘤、神经母细胞瘤和胶质母细胞瘤等肿瘤细胞。目前有研究报道,NRP2在损伤缺血部位的表达上调,可能参与生理性血管的修复;在如风湿性关节炎等一些以血管新生活动增强为特点的疾病中也发现NRP2高表达,提示其参与病理性血管生成的可能。然而,在富血管的胰腺神经内分泌肿瘤中NRP2的表达情况及其对血管生成的影响尚未见报道。本研究拟对PNETs中NRP2的表达水平及促血管生成作用行初步探索,希望为PNETs的抗血管治疗提供新的思路。方法:1.免疫组化检测人胰腺神经内分泌瘤组织标本中NRP2和血管标志物CD31的表达。2.建立胰腺神经内分泌肿瘤BON-1细胞NRP2缺失的细胞系,Western blot检测BON-1CON(对照组)和BON-1 NRP2KD(干扰组)细胞中NRP2的表达情况。3.细胞增殖实验检测对照组和干扰组条件上清对内皮细胞增殖的影响。4.细胞迁移实验检测对照组和干扰组条件上清对内皮细胞迁移的影响。5.小管形成实验检测对照组和干扰组条件上清对内皮细胞成管能力的影响。结果:1.免疫组化染色结果显示,NRP2在人胰腺神经内分泌肿瘤组织中高表达,在癌旁组织中低表达。NRP2的表达与微血管标志物CD31呈正相关。2.CCK-8检测显示对照组和干扰组培养上清处理的HUVEC细胞组间增殖无统计学差异(p>0.05):对照组吸光度为0.35±0.04,干扰组为0.32±0.04。3.细胞迁移实验结果显示干扰组细胞培养上清处理的HUVEC细胞迁移能力较对照组减弱。(1)Transwell实验结果:对照组(203±13)个/孔,干扰组(100±10)个/孔(P<0.01)。(2)划痕实验结果:对照组愈合距离为654±29,干扰组为367±24(P<0.01)。4.小管形成实验结果显示干扰组细胞培养上清处理的HUVEC细胞小管形成减少,对照组为40±5,干扰组为24±3(P<0.01)。结论:1.研究结果显示,NRP2在胰腺神经内分泌肿瘤组织中的表达明显高于癌旁胰腺组织,其表达与血管密度呈正相关,提示PNETs的发展与血管生成密切相关;2.进一步研究显示,PNETs中NRP2的缺失对肿瘤相关血管内皮细胞的增殖无影响,但能抑制其迁移、成管能力,抑制PNETs的血管生成。其作用机制有待更多实验证据证实。综上,我们认为,NRP2可作为新的诊疗靶点。通过抑制PNETs中NRP2的表达,抑制血管生成,进而抑制肿瘤生长。