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目的：构建小干扰RNA（siRNA）表达质粒，观察质粒介导的RNA干扰技术能否有效的抑制A549细胞的增殖。 方法：针对表皮生长因子受体（EGFR）基因设计构建4个可表达特异性siRNA的重组质粒，利用核酸转染试剂LipofectamineTM2000脂质体转染到非小细胞肺癌细胞系A549细胞中。瞬时转染分7组（pSilencer-1组、pSilencer-2组、pSilencer-3组、pSilencer-4组、p53-pcDNA、脂质体组及空白对照组），采用四甲基偶氮唑盐比色试验（MTT法）测定吸光度（A值）以观察转染后1、3、5、7日该细胞增殖的活力，并计算各组增殖抑制率。稳定转染则利用潮霉素对转染后的细胞进行加压筛选，得到可以稳定表达该重组质粒的A549细胞，通过流式细胞仪测定细胞周期分布情况，比较各组G0／G1期细胞百分比。 结果：1．成功构建EGFR基因的siRNA表达质粒，并通过琼脂糖凝胶电泳以及基因测序证实序列的正确。2．pSilencer-1、pSilencer-2、pSilencer-3、pSilencer-4瞬时转染A549细胞后均能引起细胞增殖活力的下降，与未转染的空白对照组相比，结果有显著差异（p＜0.05），与单转染脂质体组相比较，也有显著性差异（p＜0.05），与阳性对照P53-pcDNA组差异无显著性（p＞0.05）；P53-pcDNA组与脂质体组及空白对照组亦有显著性差异（p＜0.05）。而单转染脂质体组与空白对照组相比较，差异无显著性（p＞0.05），且4个实验组之间并无显著性差异（p＞0.05）。pSilencer-1组、pSilencer-2组、pSilencer-3组、pSilencer-4组在转染后1、3、5、7天对细胞的增殖活力影响随时间变化差异无显著性（p＞0.05）。3．pSilencer-1组、pSilencer-2组、pSilencer-3组、pSilencer-4组及P53-pcDNA组在转染后对A549细胞增殖的抑制率较脂质体组显著增加（p＜0.05），但4个实验组之间及与P53-pcDNA组之间差异无显著性（p＞0.05），