禽流感（Avian influenza,AI）是由正黏病毒科A型流感病毒属中的禽流感病毒引起的发生于各种家禽和野禽的病毒性传染病。该病于1978年在意大利鸡群中首次暴发,现已遍布世界许多国家。自1996年H5N1高致病性禽流感在我国广东地区发生以来,该病毒所感染的宿主范围越来越广,包括了很多的鸟类、哺乳动物甚至人类。H5亚型高致病性禽流感病毒除了H5N1亚型之外,还存在多种其他NA亚型病毒,目前我国H5亚型高致病性禽流感呈现了H5N1、H5N2、H5N6和H5N8等多个血清亚型的毒株同时在禽群中流行的特点。2017年至2018年期间,本研究对广东部分地区的活禽交易市场的禽类进行了样品采集,并收集了来自不同省份（山东,湖南,广西,江苏,河北等）的临床病料进行病毒分离鉴定。选取了39株H5亚型代表毒株进行全基因组的遗传演化分析、生物学特性的研究,对其中14株病毒进行了抗原性分析,研究了4株代表毒株对4周龄SPF鸡和4周龄SPF级BALB/c小鼠的致病性特点。为研究H5亚型流行毒株的分子特点,对39株H5亚型禽流感病毒的HA基因序列进行遗传演化分析结果表明,3株病毒的HA基因属于Clade2.3.2;其余36株病毒的HA基因属于Clade2.3.4.4。39株H5亚型禽流感病毒的HA蛋白裂解位点附近均存在多个连续碱性氨基酸,具有典型的高致病性禽流感病毒（Highly pathogenic avian influenza Virus,HPAIV）的分子特征;其中有1株发生了S137A、T192I两个位点的联合突变,推测该毒株对唾液酸α2-6半乳糖受体的结合能力加强。为研究H5亚型流行毒株的抗原性,挑选了14株代表毒株制备了灭活疫苗和抗血清,进行HI交叉试验,比较毒株之间的抗原差异性。其中17771与其他13株毒株的HA抗原相似性为87.8%～88.4%,抗原相关值（R）R<0.5,抗原差异显著;17771与疫苗株r FJ56-7 R值为0.63,存在较小差异,与疫苗H5-1806R值为1,表明两者抗原性相同。其余13株毒株的HA抗原相似性为96.6%～99.8%,抗原相关值（R）除抗原18012与抗血清17710为0.65,表明存在较小差异外,其余均无明显差异。为研究H5亚型禽流感病毒分离株的致病性,本研究选取了4株H5亚型代表毒株,对SPF鸡和BALB/c小鼠进行攻毒试验。采用点眼滴鼻方式感染4周龄SPF鸡,每只SPF鸡的攻毒量为106ID50,均导致SPF鸡100%死亡,在病理切片中可观察到心,肝,脾,肺,肾,脑均出现不同程度的病变。用异氟烷麻醉至小鼠呈腹式呼吸状态,采用滴鼻方式感染4周龄SPF级BALB/c小鼠,每只小鼠的攻毒剂量为106EID50,发现除18231毒株未导致小鼠死亡,该组小鼠在攻毒后第5天出现体重下降,第9天体重开始上升。其余三株均导致小鼠体重下降,死亡,其中17771及18012组小鼠100%死亡,18217小鼠死亡率达75%;在死亡小鼠的脏器中均能检测在病毒,其中肺脏及脑中检测在的病毒滴度最高;18231未出现小鼠死亡,但也在其肺脏中检测在病毒,脑中未检测到病毒复制。在病理切片中可观察到心,肝,脾,肺,肾,脑均出现不同程度的病变。结果表明,不同毒株对SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性有差异。