肝细胞癌的发病率和死亡率在我国癌症种类中都位居前列。由于大多数病人在发现时已处于进展期阶段且不再适用于手术治疗、放疗等其它治疗手段,因此常常选择化疗来改善患者的生存状态。然而肝癌的病理特征和分子改变较为复杂,使得传统的化疗方案对于肝癌敏感度较低,且容易产生耐药性。因此单一的治疗模式难以达到有效抑制肿瘤的目的,需要进行不同位点药物联合治疗策略,改变用药方式,增加效率并降低系统毒性,以实现更好抑制肿瘤的目的。纳米载药体系的出现提供了新的用药方案,通过纳米载体负载化疗药物可以完成多样化的联合治疗策略,增加血液循环时长并改变全身分布,完成靶向递送和响应性释放药物,极大的提高了药物的利用率。肿瘤组织微环境具有一些独特的特点,比如:酸性的环境、高表达一些生物酶、过氧化氢增多、中心位置缺氧以及活性氧（Reactive oxygens species,ROS）生成增多等。由于肿瘤细胞不能有效清除细胞内产生的ROS,因此显示出对ROS较高的敏感性。β-拉帕醌是具有化学动力治疗（Chemodynamical therapy,CDT）的新型药物,它在肿瘤细胞内的NAD（P）H:醌氧化还原酶-1（NQO1酶）作用下可以消耗氧气生成ROS,从而引起肿瘤细胞凋亡。但是在拉帕醌作用后加重了细胞的缺氧,肿瘤的缺氧诱导通路被激活以增加药物抵抗。有研究报道,新型化疗药物替拉扎明可以在缺氧环境中代谢生成具有脱氧核苷酸（DNA）毒性的物质,这就使得肿瘤细胞对缺氧环境更加不耐受而死亡。这两种药物联合起来,可以产生级联协同的效果,增加对肿瘤的抑制。基于此,我们构建了一种新型级联协同纳米药物系统并将其应用于肝癌的精准治疗。为了将上述两种药物同时输送到肿瘤部位,我们利用微乳液法将两种药物包裹进双亲性聚合物PEG-PO-PCL-PO-PEG和DSPE-PEG-N3形成的纳米球中。纳米球外表面通过点击化学反应连接核酸适配体TLS11a使其可以与相应受体结合,实现对肝癌细胞的靶向识别。双亲性聚合物PEG-PO-PCL-PO-PEG的过氧草酸酯（Peroxyoxalate,PO）键在肿瘤细胞内高浓度的过氧化氢作用下断裂,将内部的药物拉帕醌和替拉扎明释放出来。随后拉帕醌可以消耗氧气生成ROS造成细胞凋亡,同时由于耗氧使氧含量下降,级联引起下游药物替拉扎明在缺氧的环境发挥药效,转化成毒性代谢产物进一步放大对肿瘤细胞的损伤。具体的研究内容如下:（1）合成具有过氧化氢响应性的双亲性聚合物PEG-PO-PCL-PO-PEG,通过核磁共振氢谱进行分析。通过微乳液法负载拉帕醌和替拉扎明,并利用点击反应连接上适配体TLS11a。对材料进行粒径分析和zeta电位分析,验证药物负载并用高效液相色谱法测算药物包载率。体外验证其响应过氧化氢分解能力和药物释放特性;（2）观察其细胞毒性大小和摄取效率。在肝癌细胞中验证拉帕醌产生活性氧和消耗氧的能力。通过CCK-8检测观察药物杀伤效果;使用活/死细胞染色和流式细胞凋亡检测技术进一步验证纳米药物对肿瘤的抑制效果。（3）在Balb/C裸鼠移植瘤模型中观察纳米药物在肿瘤部位的富集和对肿瘤生长的抑制效果。通过肿瘤切片的苏木精/伊红染色,细胞增殖免疫组化（Ki-67）染色,凋亡（TUNEL）免疫荧光在分子水平观察肿瘤抑制效果。在Balb/C小鼠中观察纳米药物对正常生理状态和组织器官的影响。经过体外和体内的一系列实验,我们观察到新型纳米药物在体外具有较好的稳定性,能够响应过氧化氢刺激后分解并达到82%的药物释放量。适配体提高了细胞对药物的识别和摄入,使纳米药物在动物肿瘤中的富集增多和滞留时间延长。纳米药物中的拉帕醌在肝癌细胞中可以产生ROS并形成缺氧环境,进而促使替拉扎明的毒性代谢产物产生。这种级联协同效果具有很好的抑制作用,在体外造成80%左右的肝癌细胞死亡或者凋亡;在体内,同未使用药物组相比,肿瘤的体积减少了95%。而纳米材料自身在一定浓度范围内几乎没有毒性,且纳米药物对正常Balb/C小鼠的血细胞,血生化和主要脏器几乎没有影响,显示了较高的安全性。这种新型级联协同纳米药物可以实现对肿瘤组织的靶向和响应性作用,联合了CDT和化疗两种治疗模式,有着很好的治疗效果和较低的毒性,在应用当中有着很好的前景。