本实验利用荧光定量PCR技术,以β-actin作内参,对与水稻衰老相关基因进行表达分析,找出对水稻早衰性状有相关调控作用的基因,并通过后期实验验证这些基因对水稻早衰性状的具体作用。实验以早衰性(培矮64S、安农S-1和Y58S)和持绿性(R287、HD9802s和两优287)两类水稻叶片为样本,分析三个基因Osh69、OsDos和SGR在抽穗期,乳熟期及蜡熟期的表达量水平,并构建了相应的RNAi抑制表达载体,结果表明:(1)Osh69基因在持绿性材料中表达量上升,经T-test分析,未达到显著水平,在两优287中上升量最大,达到41%;在早衰材料中,安农S-1及Y58S中的相对表达量分别上升了 3.7倍和1.7倍,差异达到显著水平,推测该基因可能参与了水稻叶片的衰老进程。(2)SGR基因在持绿性材料中表达量上升,经T-test分析,只在HD9802s各时期之间达到极显著差异,在R287中上升量最小,只上升了 3%;在安农S-1和Y58S中表达量明显上升,差异达到显著水平,推测该基因可能与水稻叶片的衰老进程无关。(3)OsDos基因在两类水稻材料中表达量均下降,在持绿品系中,R287下降量最多,下降27%,经T-test分析,达到显著水平,而在HD9802s和两优287中分别下降了 11%和13%;在培矮64S中下降了 28%;而在Y58S中下降达到80%。(4)以表达载体pTCK303为基础,利用酶切酶连手段成功构建了三个目的基因的RNAi 抑制表达载体 pTCK303-Osh69、pTCK303-SGR和 pTCK303-OsDos,并成功遗传转化水稻日本晴和R287。