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目的:观察白藜芦醇(Resveratrol,RES)对MC3T3-E1 Subclone14细胞活力和分化的影响,并研究其对镉诱导细胞凋亡的干预及细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)信号在其中的作用。方法:1.CCK-8试剂盒(WST-8法)检测RES与镉对MC3T3-E1细胞活力的影响。2.ALP试剂盒(磷酸苯二钠比色法)检测RES与镉对MC3T3-E1细胞合成与分泌ALP的影响。3.AnnexinV-FITC/PI双染法检测RES与镉对MC3T3-E1细胞凋亡的影响。4.QPCR法检测RES与镉对MC3T3-E1细胞因子ALP、COL(40)、BMP-2及转录因子RUNX2基因表达的影响。5.Western-blot法检测RES与镉对MC3T3-E1细胞及ERK1/2抑制剂PD98059处理后细胞COL(40)、BMP-2、RUNX2、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的影响。结果:1.与Control组相比,RES(2.5μM、5μM、10μM)干预72 h,细胞活力上升,合成与分泌ALP增多,差异有统计学意义(P<0.01)。2.与Control组相比,RES(10μM)干预2h,细胞ALP、BMP-2、RUNX2 m RNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。RES(10μM)不同时间点(15、30、45 min)处理细胞,BMP-2、RUNX2、COL(40)蛋白表达增加,ERK1/2蛋白磷酸化水平增加,差异有统计学意义(P<0.01)。运用ERK1/2拮抗剂PD98059阻断ERK1/2信号后,ERK1/2蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01),COL(40)、BMP-2、RUNX2蛋白表达显著降低(P<0.01)。3.与Control组相比,镉(5μM、10μM、20μM)干预48 h,细胞活力降低,ALP分泌减少,差异有计学意义(P<0.01)。与Control组相比,镉(10μM)抑制MC3T3-E1细胞ALP、COL(40)、RUNX2、BMP-2 mRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。镉(10μM)不同时间点(2、4、8 h)处理细胞,ERK1/2蛋白磷酸化水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。4.镉(10μM)处理细胞48h后,形态学观察显示,细胞体积缩小、接连消失,与周围细胞脱离,漂浮于培养液中,而RES(10μM)与镉(10μM)共同处理组部分细胞脱离,漂浮于培养液中,多数细胞仍贴壁生长,状态正常。凋亡率检测显示,镉(10μM)诱导MC3T3-E1细胞凋亡(P<0.01),RES(10μM)改善镉诱导MC3T3-E1细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.01)。5.与单独镉处理组相比,RES(10μM)与镉(10μM)共同处理组细胞活力上升,差异有统计学意义(P<0.05),ALP分泌增多,差异有统计学意义(P<0.01)。6.与单独镉处理组比,RES(10μM)与镉(10μM)共同处理组ERK1/2蛋白磷酸化水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。运用ERK1/2拮抗剂PD98059(20μM)阻断ERK1/2信号后,与单独镉处理组相比,RES+镉组、镉+PD组p-ERK/ERK蛋白表达显著降低,RUNX2、BMP-2蛋白表达显著升高,与RES+镉组比较,RES+镉+PD组p-ERK/ERK蛋白表达显著降低(P<0.05),COL(40)、RUNX2、BMP-2蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:1.RES(2.5μM、5μM、10μM)可促进MC3T3-E1分化。2.RES(10μM)通过调控ERK1/2信号促MC3T3-E1细胞分化。3.RES(10μM)能够保护镉诱导MC3T3-E1细胞凋亡。4.镉(10μM)抑制MC3T3-E1细胞分化,RES(10μM)可改善其抑制作用,且改善作用与ERK1/2信号相关。