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目的:本实验通过观察桑皮止咳方治疗RSV感染后咳嗽BALB/c小鼠的疗效及对TLR4/TRIF/NF-?B通路的影响,探讨桑皮止咳方治疗感染后咳嗽的作用机理,为临床治疗感染后咳嗽提供有力的实验依据。材料与方法:以呼吸道合胞病毒滴鼻建立感染后咳嗽小鼠模型,将96只BALB/c小鼠随机分为:正常组、模型组、桑皮止咳方低剂量组、桑皮止咳方中剂量组、桑皮止咳方高剂量组,孟鲁司特钠组,分为6组,每组各16只,并观察小鼠一般状态、肺组织病理学改变,计数辣椒素刺激后的咳嗽、对支气管肺泡灌洗液炎症细胞进行分类并计数,分别采用免疫组化法、Western blot(蛋白免疫印迹)、RT-PCR(实时荧光定量)法检测小鼠肺组织中TLR4、TRIF、NF-?B的水平变化。探讨桑皮止咳方治疗感染后咳嗽的疗效及作用机制。结果:1.模型的鉴定:模型组咳嗽次数、BALF白细胞计数均高于正常组,具有统计学意义(P<0.05);肺部病理较正常组有明显的气道管腔狭窄,气道周围炎性浸润明显,正常组未见明显病理变化。提示造模成功。2.小鼠一般状态:模型组小鼠表现为精神萎靡,活动量减少,皮毛暗淡,鼻腔口腔有分泌物,辣椒素刺激激发后,呼吸加快,颈部前伸,腹肌收缩,抓咬口鼻等表现;正常组小鼠呼吸平和,皮毛有光泽;桑皮止咳方组及孟鲁司特钠组小鼠活动减少,皮毛欠光泽,口鼻可有分泌物,雾化后呼吸有所加快。3.咳嗽次数计数:辣椒素激发试验后,正常组小鼠咳嗽出现少量咳嗽,模型小鼠咳嗽次数显著增多,有统计学意义(P<0.05);桑皮止咳方中、高剂量组及孟鲁司特钠组与模型组小鼠对比,咳嗽次数明显降低,具有统计学意义(P<0.05)。4.肺部病理组织学检测:正常组小鼠支气管管腔光滑,黏膜上皮完整,肺泡结构大致正常,气道周围无炎症细胞浸润。模型组小鼠气道管腔狭窄,细支气管气道周围炎性浸润明显,未见明显肺间质炎症,其他药物干预组的肺部病理改变有不同程度的改善。5.支气管肺泡灌洗液中炎性细胞计数:中性粒细胞:在各组支气管肺泡灌洗液中无统计学差异(P>0.05)。淋巴细胞、单核巨噬细胞及嗜酸性粒细胞:模型组与正常组相比有明显增高(P<0.05),与模型组相比,桑皮止咳方高、中剂量组、孟鲁司特钠组不同程度降低(P<0.05);桑皮止咳方低剂量组仅降低白细胞计数(P<0.05)。6.免疫组化法检测肺组织TLR4、TRIF、NF-?B蛋白表达:与正常组相比,模型组TLR4、TRIF、NF-?B蛋白表达均显著升高,具有显著统计学意义(P<0.01),与模型组相比,桑皮止咳方高剂量组和孟鲁司特钠组TLR4、TRIF、NF-?B蛋白表达均显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组相比,桑皮止咳方中剂量组TRIF、NF-?B蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,桑皮止咳方低剂量组TRI F、NF-?B蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。7.Western blot法检测肺组织TLR4、TRIF、NF-?B蛋白表达:与正常组相比,模型组T LR4、TRIF、NF-?B蛋白表达均显著升高,具有显著统计学意义(P<0.01);与模型组相比,桑皮止咳方高剂量组和孟鲁司特钠组TLR4、TRIF、NF-?B蛋白表达均显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组相比,桑皮止咳方中剂量组TLR4和NF-?B蛋白表达显著降低,具有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,桑皮止咳方低剂量组TLR4、TRIF蛋白表达降低,具有统计学意义(P<0.05),桑皮止咳方低剂量组NF-?B表达无统计学意义(P>0.05)。8.RT-PCR法检测肺组织TLR4、TRIF、NF-?B m RNA表达:与正常组相比,模型组TLR4、T RIF、NF-?B m RNA表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05),与模型组相比,桑皮止咳方中、高剂量组和孟鲁司特钠组TLR4、TRIF、NF-?B m RNA表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,桑皮止咳方低剂量组TLR4、TRIF、NF-?B m RNA表达无统计学意义(P>0.05)。结论:1.桑皮止咳方可有效改善小鼠的一般状态、减轻咳嗽症状。2.桑皮止咳方可改善肺组织病理改变,显著降低PIC小鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞含量,缓解气道炎症。3.桑皮止咳方可降低TLR4、TRIF、NF-κB在肺部的表达,推测该复方制剂可能通过调控TLR4/TRIF/NF-κB信号通路,减轻感染后咳嗽的气道炎症反应。