大剂量照射后早期小鼠骨髓表达基因的初步研究

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目的 辐射能诱导细胞基因表达的改变,机体辐射损伤效应是大量基因表达变化的结果。骨髓型急性放射病以骨髓等造血组织损伤为基本病变,为深入理解骨髓辐射损伤的分子机制,有必要研究整体照射条件下,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 运用抑制消减杂交(SSH)和cDNA阵列杂交等分子生物学技术,以及序列比对等生物信息学分析方法研究大剂量照射后早期小鼠骨髓基因在mRNA水平的差异表达。结果成功构建C57BL/6J小鼠受7Gyγ射线照射后4hr的骨髓组织相对未受辐射正常对照的消减cDNA文库,经PCR鉴定后,保存480个含差异表达cDNA片段的单克隆。7Gyγ射线照射后4hr C57BL/6J小鼠骨髓表达可能升高的基因有一未命名蛋白、干扰素诱导蛋白(IFIT1)、嗜中性粒蛋白(NPG)、钙结合蛋白(S100a8)、珠蛋白α链(Hba1)、MPG(甲基嘌呤糖基化酶)、CDKN1A(周期蛋白依赖的蛋白激酶抑制蛋白)、CAT(过氧化氢酶)、HO1(血红素加氧酶)和CYP2E1(细胞色素P450家族成员);表达可能降低的有CCT3(分子伴侣3)、NAT3(N-乙酰转移酶3)、NPM1(核仁蛋白)、PTGS1(前列腺素内过氧化物合酶)、UGT1A1(UDP葡糖甘酰转移酶);同时分离了可能代表辐射相关新基因的EST序列。已验证CDKN1A与一新登录EST(BU101501)在辐射后表达升高,其余基因是否真正辐射后差异表达及差异表达机制仍有待进一步的实验研究。结论 辐射后差异表达基因的功能及表达调控规律反映骨髓作为造血免疫器官在辐射后功能的变化和辐射后骨髓神经内分泌调节系统的变化,也应证了辐射诱导基因对机体起保护作用的一般功能规律。本工作为进一步分离辐射相关差异表达基因、探索骨髓辐射损伤分子机制的研究奠定基础。
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