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目的:探讨癌-睾丸抗原CT23对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法:(1)用RT-PCR和免疫细胞化学方法筛选高表达CT23的胶质瘤细胞株;(2)用阳离子脂质体法将特异性CT23siRNA转染胶质瘤细胞,对siRNA转染条件进行优化,用RT-PCR和Western blot验证CT23干扰效率后,进行相关的实验;(3)CCK8法检测细胞的生长增殖能力;(4)流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况;(5)Western blot检测细胞周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白B(cyclin B)和凋亡相关蛋白caspase 3的表达水平;(6)划痕修复实验、Transwell迁移实验观察细胞迁移能力;(7)Transwell Matrigel侵袭实验观察细胞侵袭能力、Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP2)和金属蛋白酶9(MMP9)表达水平;(8)通过Martrigel粘附检测细胞黏附能力。结果:(1)确定胶质瘤细胞株U251MG和U87MG为实验对象;(2)经RT-PCR和Western blot检测,实验组较对照组CT23表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);(3)CCK-8法检测结果显示,下调CT23表达后,两株胶质瘤细胞增殖能力较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);(4)流式细胞仪检测细胞周期结果显示,胶质瘤细胞CT23表达下调后,S期细胞减少,G2/M期细胞增加(P<0.01),G0/G1期细胞所占百分数无统计学差异(P>0.05);Western blot结果显示,CT23表达下调后周期蛋白cyclin A表达水平下降,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01),CT23表达下调后周期蛋白cyclinB表达水平与对照组比较无统计学差异(P>0.05);(5)流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,CT23 siRNA组的早期凋亡细胞百分比增加,与对照组比较其差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,CT23表达下调后caspase 3蛋白表达水平升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);(6)划痕修复实验中,在12h时间点,两株胶质瘤细胞组间的修复率无统计学意义(P>0.01);在24h时间点,CT23siRNA组的修复率较对照组明显降低,其差异具有统计学意义(P<0.01);Transwell迁移实验显示,下调CT23表达可导致穿膜细胞数降低,与对照组具有统计学意义(P<0.01);(7)Transwell Matrige1侵袭实验中,CT23 siRNA组穿膜细胞数较对照组明显降低(P<0.01);Western blot检测MMP2、MMP 9的结果显示,下调CT23表达后两株胶质瘤细胞的MMP 2、MMP 9表达量均下降,与对照组比较具有统计学差异(P<0.01);(8)粘附实验结果显示,两株胶质瘤细胞在转染CT23 siRNA后,其黏附能力均下降(P<0.01)。结论:CT23表达下调可减弱胶质瘤细胞细胞的恶性生物学行为,本研究为下一步的动物实验奠定基础,并提示将阻断CT23的表达方法用于胶质瘤的治疗具有潜在的临床应用价值。