CCL2在胃癌发生发展中的作用

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目的:间质干细胞(MSC)是肿瘤微环境的重要组成成分之一,从胃癌组织分离出的胃癌间质干细胞(GC-MSC)血清中细胞因子CCL2表达水平较高,但CCL2在胃癌中的作用还不清楚。本研究旨在探索CCL2对胃上皮和胃癌细胞的作用及相关机制,为探讨细胞因子在肿瘤发生发展中的作用提供新的依据。  方法:应用Luminex技术检测不同种类MSC血清中CCL2的表达,采用Western blot检测人胃粘膜上皮细胞GES-1、胃癌细胞和GC-MSC细胞中CCR2的表达。采用平板克隆形成和transwell迁移实验评价CCL2作用后的GES-1和MGC-803细胞增殖和迁移的改变。Western blot及免疫荧光检测化学致癌物MNNG预处理GES-1细胞或转化后GES-1细胞中CCR2的蛋白水平,平板克隆形成实验检测GES-1细胞增殖能力的变化,采用transwell迁移实验检测CCL2长期刺激这两种细胞后它们迁移能力的变化,结合Western blot和免疫荧光检测EMT相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达。采用transwell实验验证CCL2对GC-MSC趋化性的影响。平板克隆形成实验和transwell迁移实验分别来评价CCL2刺激后的BM-MSC和GC-MSC血清对MGC-803细胞和SGC-7901细胞增殖和迁移能力的影响。  结果:Luminex结果显示GC-MSC血清中CCL2表达水平较高,且GES-1细胞和胃癌细胞中均表达CCR2,但表达均不高,其中MGC-803细胞表达水平最高。重组体CCL2对GES-1细胞和MGC-803细胞的增殖和迁移能力均无作用。GES-1细胞经MNNG预处理或转化(MC细胞)后,CCR2水平明显上调,但增殖能力无改变。用CCL2分别刺激MNNG预处理的GES-1细胞或MC细胞,发现CCL2能明显促进它们的迁移和EMT转化。BM-MSC和GC-MSC细胞中均表达CCR2,且CCL2增强了GC-MSC细胞的趋化性。CCL2刺激后的BM-MSC和GC-MSC血清对MGC-803细胞和SGC-7901细胞的增殖能力无明显影响,但能显著地促进它们的迁移。  结论:结果表明,在致癌物质MNNG作用下,CCL2/CCR2细胞因子信号通路能调节胃上皮细胞的EMT转化以及随后的胃癌发生;CCL2刺激GC-MSC细胞后,其上清能促进胃癌细胞的迁移。这些结果提示细胞因子在肿瘤发展中的确发挥重要作用,为探索胃癌治疗靶点提供新的思路。
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