长非编码RNASNHG20通过表观调控P21促进人非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lcm2005
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研究背景:越来越多的证据表明,长非编码RNA(Long noncoding RNAs,lnc RNAs)是控制多种生物学过程的新型转录产物,其失调控参与了多种类型肿瘤的发生和发展。SNHG20是一个2183 bp的lnc RNA,已有研究表明SNHG20的表达异常与结直肠、肝癌的发生相关。然而,SNHG20的临床相关性及其影响肺癌细胞表型的分子机制还没有阐明。目的:探讨长非编码RNA SNHG20在NSCLC中发挥的生物学功能及分子机制。方法:(1)通过TCGA数据库分析SNHG20在NSCLC组织中的表达情况。(2)荧光实时定量PCR检测SNHG20在癌组织和癌旁组织及细胞系中SNHG20相对表达量。(3)体外实验(MTT、克隆形成实验、Ed U实验、流式细胞技术等)评价SNHG20对NSCLC细胞增殖的影响。(4)体内实验(裸鼠移植瘤模型)研究SNHG20对NSCLC细胞体内成瘤能力的影响。(5)高通量转录组测序寻找SNHG20下游调控的靶基因,q RT-PCR及Western blot验证测序结果。(6)RNA免疫共沉淀实验、染色质免疫共沉淀实验研究SNHG20调控靶基因P21的分子机制。(7)拯救实验验证SNHG20对P21的调控。结果:SNHG20在NSCLC组织中表达上调,SNHG20的高表达与肿瘤大小、TNM分期及不良预后密切相关。抑制SNHG20的表达显著抑制NSCLC细胞的增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G1/G0期。机制为SNHG20与EZH2结合,通过表观遗传学调控靶基因P21的表达,发挥类似癌基因的作用。结论:SNHG20在NSCLC中扮演癌基因角色,抑制SNHG20的表达显著抑制肺癌细胞生长,SNHG20可作为NSCLC诊治、预后的潜在新靶标。
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