结直肠癌(colorectal cancer)是常见的消化道恶性疾病。5-FU(5-fluorouracil)作为抗代谢抗肿瘤药物,是治疗晚期结直肠癌患者的一线用药。在临床治疗过程中产生的化学耐受性严重影响力了药物疗效,然而其潜在的分子机制并不明确。因此,探索结直肠癌5-Fu获得性耐药的分子机制,对于指导肿瘤精准治疗具有重要意义。方法在体外通过药物诱导构建结肠癌5-Fu获得性耐药株HCT-8/5-Fu模型;基于全转录组测序(RNA-Seq)技术,分析结肠癌HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu细胞中存在的差异基因;结合甲基化芯片分析以及TCGA数据库对差异基因中表达显著上调和显著下调的基因进行分析,依据相关的文献报道筛选出耐药相关基因;通过细胞功能试验验证耐药相关基因表达量的变化和结肠癌获得性耐药之间的联系。结果1)体外药物诱导构建获得了具有5-Fu耐药性(RI=3.29)的细胞模型HCT-8/5-Fu。2)转录组测序共获得了453个差异基因,其中245个上调基因,208个下调基因,并筛选出了在肿瘤中参与了多个生物学过程的基因WNT6。3)通过细胞生存率、细胞凋亡、细胞周期以及细胞迁移实验对WNT6基因的功能进行验证。结果表明,当WNT6基因被敲减时,可以提高HCT-8/5-Fu细胞对药物的敏感性,并且可以显著提高5-Fu诱导的细胞凋亡,另外细胞的增殖和迁移能力也都受到了抑制。结论通过细胞功能试验可确定WNT6基因在调节结肠癌HCT-8细胞的耐药性中发挥着重要作用。本研究探索了结肠癌获得性耐药的分子机制,为结肠癌的精准治疗提供了新的分子靶标。