辣木叶植物化学物质分析及体外生物活性研究

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:jiangda
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辣木叶于2012年被我国卫生部批准为新资源食品,含有丰富的植物化学物质,具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血压、降血糖等功效。本论文以云南辣木叶为原料,研究了辣木叶提取物(MLE)植物化学物质的组成及含量;采用ABTS、DPPH自由基清除能力和FRAP三种抗氧化体系相结合的方式评价了其抗氧化能力;同时测定了其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用;并研究了其对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠RAW264.7细胞NO释放量及相关基因iNOS的表达量。主要研究结果如下:1.主要对MLE总酚含量、植物化学物质组成及含量进行了测定分析,总酚含量为20.16 mg GAE/g DW,并鉴定出39种植物化学物质。包括8种有机酸、2种氨基酸、2种羟基苯甲酸、6种羟基肉桂酸、14种黄酮醇、2种黄酮和5种硫代葡萄糖苷。表明MLE富含一定量的植物化学物质,并且植物化学物质种类丰富。MLE富含柠檬酸和苹果酸,含量分别为199.71和658.86μg/g DW。亚麻酸和亚油酸的含量较高,分别为506.46和192.30μg/g DW;MLE中绿原酸含量较高,达2218μg/g DW。MLE还富含阿魏酰奎宁酸和香豆酰奎宁酸,含量分别为900.98和878.30μg/g DW。此外,MLE富含异硫氰酸酯,达3688.31μg/g DW。其中,乙酰基-苄基菊糖异硫氰酸酯含量最高,为1152.81μg/g DW。2.运用三种抗氧化体系测定了MLE的抗氧化活性,Vc作为阳性对照。结果发现,在DPPH自由基清除体系中,MLE和Vc的IC50值分别为5.18和3.31μg/mL。MLE清除DPPH自由基活性略低于Vc。而且显示出较高的ABTS自由基清除活性,IC50值为2.44μg/mL。FRAP体系中,MLE和Vc的IC50值分别为2.66和1.05μg/mL,其抗氧化能力的顺序是Vc>MLE。3.测定了不同浓度MLE溶液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制活性。结果表明MLE对金黄色葡萄球菌具有良好的抑制作用,且抑制作用与浓度间呈现量效关系;当浓度为50和500μg/mL时,抑制率分别达到41.28%和84.82%。而浓度为50-500μg/m L的MLE对大肠杆菌无抑制作用。4.在LPS诱导的RAW264.7细胞中添加不同浓度的MLE均对iNOS mRNA的表达产生了一定影响。当其浓度为40μg/mL时,对iNOS mRNA表达的抑制效果比较明显。并且随着浓度的增加抑制效果更为明显,说明MLE对iNOS mRNA表达量的抑制作用呈现浓度依赖趋势,这与MLE对RAW264.7细胞NO释放量的影响趋势相一致。由此可见,MLE可以通过抑制iNOS mRNA的表达实现对NO释放量的抑制,从而证明MLE具有抗炎作用。
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