【摘 要】
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目的 1．研究两种人工合成的赖氨酸-多巴复合物（Lysine-DOPA compound）：LD80-20和LD90-10（表示DOPA质量百分比分别为20％和10％）是否能促进成骨细胞的粘附性以及对细胞的增殖和钙化能力是否有影响 （1）．LDS0-20和LD90-10对MC3T3细胞伸展性的影响 （2）．LD80-20和LD90-10对MC3T3细胞粘附性的影响 （3）．
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目的 1．研究两种人工合成的赖氨酸-多巴复合物（Lysine-DOPA compound）：LD80-20和LD90-10（表示DOPA质量百分比分别为20％和10％）是否能促进成骨细胞的粘附性以及对细胞的增殖和钙化能力是否有影响 （1）．LDS0-20和LD90-10对MC3T3细胞伸展性的影响 （2）．LD80-20和LD90-10对MC3T3细胞粘附性的影响 （3）．LD80-20和LD90-10对MC3T3细胞增殖能力的影响 （4）．LD80-20和LD90-10对MC3T3细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的影响 （5）．DOPA成分的作用 2．运用骨室种植体（Bone Chamber Implantation，BCI）技术体内观察经皮电神经肌肉刺激（Transcutaneous Electrical Neuromuscular Stimulation，TENS）引起的骨骼肌收缩是否会影响骨生长和骨血液微循环 （1） 骨骼肌收缩是否影响骨生长速度和骨矿物质含量 （2） 骨骼肌收缩是否影响骨血管生长速度 （3） 骨骼肌收缩是否影响骨毛细血管通透性方法 1.将培养板（皿）表面用不同的Lysine一DO队compound处理后接种一定数量细胞，在不同时间点:运用助edamine phaunidin一DAPI染色计算细胞平均伸展面积;运用Jet imPingement系统测量细胞粘附力;通过检测细胞总蛋白量计算细胞增殖能力;通过检测ALP活性评价细胞钙化能力;并与FN和PLL的作用进行比较。同时通过H202氧化作用使DoPA成分失去活性，可检测DOPA成分的作用。分别在有血清和无血清两种条件下进行实验 2.将30只雌性健康新西兰大白兔（6一10月，3一3.skg）随机分为两组，每组15只，所有动物均于右侧胫骨植入BCI，实验组于术后第2周开始行TENS刺激实验侧胖肠肌收缩，TENS频率4HZ，每日1小时，每周6日，对照组无TENS刺激。术后3周起，每周通过BCI行体内显微观察，实验组同时行TENS刺激。光镜下观察骨长入情况，通过荧光染料FITC和甩TC观察血管生长情况，观察结果通过数码照相和数码摄像进行记录，术中进行心率和血压检测。10周后，分离排肠肌，测量TENS刺激引起的膝肠肌收缩力大小，实验结束。在第3周和第10周分别行CT扫描，检测骨矿物质含量。所有图像由Mctamorph图像处理软件进行分析，计算。结果 1.(扮无血清条件下，LDso一20和LD90一10无论短时间作用（lhr）或较长时间作用（24hr）均能显著提高MC3T3细胞粘附力与伸展性，其作用效果介于非特异性粘附分子PLL与受体介导的特异性粘附分子FN之间，LDSO一20和LD90一10之间并无显著性差异;DOPA失活后，LDSO一20和LDgO一10对细胞粘附力与伸展性无影响。在有血清条件下，lhr时LD80一20和LDgO一10组细胞粘附力与伸展性均高于阴性对照组，而与PLL和FN组并无显著差异，24hr后各组间均无显著差异;DOPA失活后，LD80一20和LD90一10对细胞粘附力与伸展性无影响;（2）LD80·20和LDgO一10对细胞增殖有促进作用，DOPA失活后则无此作用;（3）LD80一20和LD90一10对MC3T3细胞ALP活性无影响。 2.（1）实验组骨生长速度与骨矿物质含量均显著大于对照组;（2）实验组平均血流量显著大于对照组;（3）实验组血管平均管径和血管总容量与对照组并无显著差异;（4）实验组毛细血管通透性显著大于对照组。结论 1.两种助sine一DoPA eompound:LD8o一20和LD90一10均能够提高MC3T3细胞粘附力和伸展性，无血清条件下这种作用更明显;LD80一20和LDgO一10能够提高MC3T3细胞增殖能力，对MC3T3细胞ALP活性无影响;在Lysine一DOPA comPound对MC3T3细胞的作用中DOPA成分起关键作用，但LD80一20和LD90一10之间并无差别。 2.骨骼肌收缩可以提高骨生长速度和骨矿物质含量;骨骼肌收缩能提高骨血流速度和骨毛细血管通透性;对血管生成无影响。
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