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目的:以20mJ/cm~2UVB辐射体外培养的HaCaT细胞建立细胞损伤模型,研究扇贝多肽(PCF)在UVB损伤HaCaT细胞中的抗凋亡作用及其作用机制。方法:细胞实验设计分为6组:对照组、UVB模型组、UVB+0.5%PCF组(PCF1组)、UVB+0.25%PCF组(PCF2组)、UVB+0.125%PCF组(PCF3组)、UVB+0.1%(VitC组)。HaCaT细胞与PCF或VitC孵育2小时后,接受UVB照射。除Caspase-3外,其它实验均于照射后18小时进行:不同剂量(5、10、15、20mJ/cm~2)UVB辐射,确定辐射参数;琼脂糖凝胶电泳观察各组不加入或预先分别加入ERK抑制剂(PD98059)、JNK抑制剂(SP600125)、p38抑制剂(SB203580)和Caspase-3抑制剂(DEVD-FMK)后的DNA ladder;流式细胞仪检测Caspase-3的含量;western-blot检测磷酸化ERK、JNK、和p38的活性;应用基因芯片技术检测PCF预处理的UVB辐射HaCaT细胞的基因表达。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示,不同剂量的UVB辐射,在20mJ/cm2的剂量下,HaCaT细胞呈现特征的凋亡带;0.5%、0.25%、0.125%的PCF和0.1%VitC能够抑制20mJ/cm~2 UVB辐射诱导HaCaT细胞凋亡,其中0.5%PCF抑制凋亡的效果最优;PD98059预处理后,模型组、不同剂量PCF组、VitC组DNA片段增加,而给予SP600125、SB203580和DEVD-FMK预处理后上述各组DNA凋亡条带减少。流式细胞术结果表明PCF在0.125%-0.5%范围内剂量依赖性降低UVB诱导HaCaT细胞的Caspase-3含量(p<0.05,p<0.01)。Western blot结果观察到PCF能提高磷酸化ERK的活性但降低磷酸化JNK及磷酸化p38的活性。基因芯片技术结果显示PCF能够抑制调控细胞周期进程的p27和p15基因,增强调控细胞凋亡的NDRG1基因,下调参与细胞凋亡的p8、STK3和TP53INP1基因,上调抗细胞损伤的基因GPX和p44,调节参与细胞增殖和能量代谢的基因。结论:以辐射强度20mJ/cm~2为参数,PCF抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡。PCF的抗凋亡作用是通过降低细胞内Caspase-3含量、提高磷酸化ERK的活性、抑制磷酸化JNK及磷酸化p38的活性来实现的。细胞周期调控基因p27和p15、凋亡相关基因NDRGl,p8,STK3和TP53INP1、抗细胞损伤基因GPX和p44及细胞增殖和能量代谢相关基因均参与了PCF的抗凋亡作用。