膜荚黄芪[Astragalus membranaceus (Fish.)Bge.]为豆科黄芪属多年生的草本植物,是中国传统的补益药之一。黄芪根味甘、性温,归脾和肺经,具有补气固表、敛疮生肌、排脓、利尿脱毒之功效；黄芪叶升清滋液、宣通经咏、疏通气血、消肿化瘀之功能,目前药用膜荚黄芪多使用其根部入药,而黄芪叶的产量是根的几倍研究使用较少,从而造成了极大的资源浪费。因此,为了阐明黄芪叶的化学成分,进而比较与其根部化学成分的异同,扩大药源、合理地开发和利用黄芪资源,本研究对黄芪叶进行了化学成分研究,并针对黄芪叶中4种主要的黄酮类成分进行了含量测定研究。1、通过正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶、反相ODS等柱色谱和制备型HPLC等技术和方法,共分离得到22个化合物。采用13C-NMR谱、1H-NMR谱、DEPT谱、HSQC谱、1H-1H COSY谱和HMBC谱等1D及2D-NMR波谱学测试手段,并结合HR-ESI-MS质谱技术,共鉴定了20个化合物的结构,包括10个三萜类化合物,分别为(24E)-双键-3β,6α,16β,27-四取代-6α-乙酰基-16β-羟基-9,19-环菠萝蜜烷-3-O-β-D-木糖-27-O-β-D-葡萄糖苷(1)、(20R,24s)-11α,16β,25-三羟基-20,24-环氧-9β,19-环菠萝蜜烷-3,6-二酮(2)、大豆皂醇E(3)、3β,21α,24三羟基-齐墩果-12-烯(4)、3β,22β,24,29-四羟基齐墩果-12-烯(5)、黄豆醇B(6)、豌豆皂苷1(7)、大豆皂醇B-3-O-β-D-葡萄糖醛酸-(1→2)β-D-葡萄糖-(1→4)α-L-鼠李糖苷(8)、膜荚黄芪叶皂苷C(9)、黄芪甲苷Ⅱ(10);7个黄酮类化合物,分别为3,3′,4′,5,7-五羟基黄酮(11)、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷(13)、山奈酚3-O-[6″-O-(反式-对-肉桂酰基)]-β-D-葡萄糖苷(14)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖苷(15)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-(1″′-2″)-β-D-芹糖苷(16)、沙苑子苷(17);3个其它类化合物,分别为去氢二松柏醇-4-O-β-D-葡萄糖(18)、(22E,20S,24R)-5α,8α-桥二氧-麦角甾烷-6,22-二烯-3β-醇(19)、(2S,3S,4R,8E/Z)-2-(2′-hydroxylignoceroyl amino)-8-octadecene-1,3,4-trio1-O-β-D-glucopyranoside(20)。其中化合物1、2为新化合物,分别命名为黄芪叶苷L、黄芪叶苷元Ⅸ,化合物3、5、7、8、13、14、16、18、19、20为黄芪属首次分离得到,化合物4、10、11、12、17为黄芪地上部分首次分离得到。2、首次采用HPLC法测定黄芪叶中4种主要黄酮类化合物的含量。采用Diamonsil-C18分析色谱柱(5μm,4.6mmx250mm),以甲醇(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱(0～50min,10%A→85%A),流速1.0mL·min-1,检测波长267nm,柱温25℃。沙苑子苷(17)、鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷(13)、山奈酚3-O-[6"-O-(反式-对-肉桂酰基)]β-D-葡糖糖苷(14)、鼠素柠檬素3-Oβ-D-葡萄糖苷(15)的线性范围分别为1.2960-20.736μg(r=0.9999)、1.760～28.16μtg(r=0.9999)、0.6900～11.04μg(r=0.9996)、2.0660～33.056μg(r=0.9998),平均加样回收率在97.21%-102.4%之间,RSD在1.7%-2.5%之间。实验结果表明该质量评价方法准确、简便、重现性好,可用于黄芪叶中黄酮类化合物的质量评价。本研究不仅进一步阐明了黄芪这一常用中药的药效物质基础,丰富了天然有机化学的内容,为研制出具有自主知识产权黄芪叶新制剂提供不可或缺的科学依据;同时对制定黄芪叶的国际认可的质量标准,提高、保证黄芪药材及制品的质量,开发新的天然药用植物资源具有重要的意义；通过对常用中药黄芪的非药用部位进行的二次开发,将可扩大药用来源,为充分利用丰富的药用植物资源提供了可能。