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目的:确定小鼠乳腺癌细胞4T1抗原致敏的树突状细胞(DC)疫苗,在体内外抗肿瘤免疫的效应;探讨吲哚-2,3-双加氧酶(IDO)化学抑制剂左旋-1-甲基色氨酸(L-1-MT)联合DC疫苗治疗对荷乳腺癌小鼠肿瘤引流淋巴结(TDLN)中IDO表达水平的抑制程度及其增强荷瘤小鼠肿瘤免疫应答的机制。方法:1、体外培养BALB/c小鼠骨髓来源的DC,用小鼠乳腺癌细胞4T1冻融抗原致敏来制备肿瘤特异性DC疫苗。流式细胞仪检测DC成熟表型;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力;以4T1为靶细胞,DC致敏的T细胞为效应细胞检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外特异性杀瘤效应。2、雌性BALB/c小鼠于第四脂肪垫下接种乳腺癌细胞4T1 1×105 cell/只建立荷瘤小鼠模型。荷瘤小鼠随机分成对照组,DC疫苗组,L-1-MT组,L-1-MT联合DC疫苗组,分别给予生理盐水、DC疫苗、L-1-MT、L-1-MT联合DC疫苗治疗。测量肿瘤大小,描绘肿瘤生长曲线;于接种后第21d处死小鼠,取各组小鼠肿瘤组织,TDLN及脾脏;称取肿瘤重量;Western blot测定TDLN中IDO表达水平,流式细胞仪检测TDLN及脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Tregs比例;MTT比色法检测荷瘤小鼠体内T淋巴细胞特异性细胞毒作用。结果:1、4T1冻融抗原致敏的DC(4T1-DC)组表面共刺激分子CD40,CD80,CD86的表达明显高于未致敏DC(DC)组(P<0.01);4T1-DC具有更强的刺激T淋巴细胞增殖能力,在刺激细胞与效应细胞比例为1∶10时的刺激指数最高,4T1-DC组、DC组分别为8.45±0.24、6.56±0.29(P<0.01);在效应细胞与靶细胞比值为40∶1和20∶1时,4T1-DC组致敏的CTL体外特异性杀瘤效应均高于DC组分别为35.03±1.01、27.02±1.33和31.00±1.06、23.96±1.06(P<0.01)。2、接种乳腺癌细胞4T1后的肿瘤生长曲线显示:L-1-MT联合DC疫苗组肿瘤生长速度最慢;第21天时的肿瘤体积和重量均为CON组>DC疫苗组>L-1-MT组>L-1-MT+DC组(P<0.05)。L-1-MT+DC联合治疗组与CON组相比,抑瘤率为43%。3、Western blot检测各组TDLN中IDO相对表达量及流式细胞仪测定的TDLN与脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的比例均为DC疫苗组>CON组>L-1-MT+DC组>L-1-MT组(P<0.05)。结论:1.应用DC疫苗治疗的荷乳腺癌小鼠TDLN中IDO表达明显增高,且TDLN及脾脏CD4+CD25+Foxp3+Tregs的数量增多,这可能是影响乳腺癌免疫治疗效果的重要因素之一。2.L-1-MT可有效抑制荷乳腺癌小鼠体内IDO蛋白的表达,同时可以下调小鼠TDLN及脾脏内CD4+CD25+Foxp3+Tregs的数量,从而增强DC疫苗抗肿瘤效应有效抑制肿瘤生长。