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国内外的研究已经证实人巨细胞病毒(HCMV)的感染是启动动脉粥样硬化(AS)的主要危险因素,HCMV的感染还与冠心病、肥胖、2型糖尿病等糖脂代谢紊乱性的疾病有关。一些研究表明,HCMV感染通过激活甾醇调节元件结合蛋白1c(SRBP1c)的表达诱导脂质的生成。而SREBP1c在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝脏脂肪变性的发展中起着关键作用。最近的研究表明,人巨细胞病毒(HCMV)感染可能在包括NAFLD在内的代谢疾病的发病机制中发挥作用,但目前HCMV编码的IE2是否在这一过程中发挥重要的作用还不清楚。近几十年来,HCMV感染对脂质代谢异常机制的研究主要在离体的细胞水平进行,很少在活体内研究。目的:由于HCMV的高度种属特异性,本实验首先建立能稳定表达IE2蛋白的UL122基因修饰小鼠模型来克服种属特异性的障碍。其次,进一步的研究IE2对UL122基因修饰小鼠的肝脏脂质代谢和SREBP1c表达水平的影响。方法:j建立了能稳定持续表达IE2蛋白的UL122基因修饰小鼠模型。k通过PCR技术鉴定UL122基因阳性小鼠,将小鼠分成实验组(UL122转基因阳性小鼠)和对照组(野生型C57BL/6小鼠,每组n=16只)。l测小鼠体重,眼眶取血,收集血清,检测空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等相关临床糖脂代谢指标的含量。m采用比色法测量其肝脏中的甘油三酯含量。n采用油红O-染色法分析肝脏组织中脂质的状况。o采用HE染色观察IE2对肝脏组织结构的影响。p采用实时荧光定量PCR技术检测肝脏中SREBP1c mRNA水平的表达情况和实验组中IE2 mRNA水平的表达情况。q采用免疫组化技术检测肝脏组织中IE2和SREBP1c的表达及分布情况。结果:jPCR结果表明,UL122转基因小鼠建模的成功。k从30周开始,实验组小鼠的体重显著高于对照组小鼠体重,且具有统计学意义(P<0.05),在实验组和对照组小鼠中,空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)的浓度出现明显的差异,具有统计学意义(P<0.05);总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。l比色测定法结果表明,实验组与对照组相比,甘油三酯的含量在实验组中明显增加(P<0.05)。m油红O-染色法结果显示,与对照组相比实验组中肝脏组织中脂滴大且明显积聚。nHE染色结果显示,与对照组相比,实验组肝脏组织结构紊乱,有脂肪空泡的出现,肝脏发生脂肪变性。o荧光定量PCR结果显示,实验组肝脏中SREBP1c mRNA水平的含量要明显高于对照组(P<0.05)。在实验组中,在mRNA水平上,SREBP1c与IE2呈正相关关系,SREBP1c mRNA水平的含量随着IE2mRNA水平的增加而增加。p免疫组化结果表明实验组肝脏的IE2呈阳性,在核内表达,对照组肝脏中IE2呈阴性;实验组肝脏中SREBP1c的表达显著升高(P<0.001)。结论:在UL122转基因小鼠中,小鼠的体重、空腹血糖、甘油三脂的含量均要高于同龄野生型C57BL/6小鼠,且UL122转基因小鼠中SREBP1c表达显着升高,其在肝细胞中的过表达可促进甘油三酯积聚和肝脏脂肪变性。综上所述,我们的数据表明HCMV感染与NAFLD的发生和发展相关,SREBP1c过表达可促进肝脏脂肪变性,并且这种上调SREBP1c的表达很可能由IE2介导。本实验中UL122转基因鼠建模的成功克服了HCMV种属特异性的限制,进一步实现了在小鼠体内IE2对脂代谢影响的研究。这将为HCMV编码IE2蛋白导致糖脂代谢异常的分子机制奠定了理论基础。