目的：随着生物医学和遗传工程技术的发展，蛋白质及多肽类药物的种类和数量日益增多，临床应用越来越广泛，相应的制剂学研究也日益受到重视。临床上常用的蛋白质及多肽类药物，如血管紧张素抑制剂、心房肽激素、脑啡肽、人生长激素，免疫调节药物如集落刺激因子，代谢性调节药物如胰岛素等。这些药物大多为内源性物质，药物作用强、不良反应小、很少引起过敏反应；但是，与传统的小分子药物相比，此类药物的稳定性差、体内半衰期短、不易透过生物膜、脂溶性差、口服生物利用度低，特别是此类药物经口服后，会受到胃肠道酶的破坏，以及肝脏的首过消除作用。 因此，目前多采用传统的皮下、肌内或静脉注射的给药途径。传统的皮下、肌内或静脉注射给药方法，对于需要终身使用药物替代治疗的患者来说，将会带来极大的痛苦和不便。因此，近年来非口服给药方法，如皮肤和直肠、鼻腔、眼、口腔、气道、阴道等粘膜给药途径，受到越来越多的重视，并得到广泛的研究。与此同时，相应的制剂学和给药方式，以及药物的吸收促进剂等探讨，也极大的促进了非口服给药途径的研究与进展。 采用口腔或舌下含服的给药方式，是目前最为方便和最易被大多数患者所接受的；特别是舌下含服给药途径，越来越受到重视。已有许多研究表明，在配合使用吸收促进剂的情况下，给予胰岛素舌下滴剂，可以明显降低实验大鼠的血糖。本文旨在通过对大鼠舌粘膜和粘膜下层结构特点的观察，为多肽类药物跨舌粘膜吸收的途径和能力，提供结构基础方面的证据。方法：选用健康成年SD大鼠，雌雄不限，体质量为150～200g，随机分成三组，采用腹腔注射2％戊巴比妥钠溶液(30～35 mg/kg)麻醉。 一组切取整舌，经OCI、包埋后，置于液氮内冷冻，恒冷切片机连续切片(片厚5μm)，切片经二甲砷酸缓冲液配制的4％多聚甲醛固定20min，经双蒸馏水清洗3次，各5min，按顺序滴加5’-核苷酸酶和碱性磷酸酶反应孵育液，反应后充分清洗，水性封片剂封片；相邻组织切片均进行HE染色，与酶组织化学染色切片对照观察。 二组经左心室温生理盐水冲洗后，灌注3％多聚甲醛和1％戊二醛混合固定液，行组织内固定后，再切取整舌用于扫描电镜的样品制备，标本置于2％单宁酸溶液中，做组织导电处理，经1％锇酸溶液后固定，梯度乙醇脱水、叔丁醇冻结真空升华干燥、真空离子镀膜仪镀金后，用扫描电镜观察、拍照。 三组用于透射电镜样品制备，于低温操作台上，切取新鲜舌，将靠近舌根处的舌腹侧组织，置于3％多聚甲醛和l％戊二醛混合固定液中，浸泡固定；修成1mm×2mm×3 mm的组织块，经0.01mmol/L酸盐缓冲液充分清洗，先后置于2％单宁酸和1％锇酸溶液中，行导电处理和组织后固定各2h，梯度乙醇脱水，丙酮置换，Epon-812树脂浸透和包埋。部分组织块做半薄切片，用美蓝染色和光镜观察，确认组织块内，包含有舌腹侧粘膜和粘膜下层。修切组织块以适于超薄切片，超薄切片载于200目铜网上，经醋酸铀和枸橼酸铅电子染色后，用透射电镜观察和摄像。另外，将已经酶组织化学双重染色的组织切片，用梯度乙醇脱水，叔丁醇置换，置于烤箱干燥后，应用扫描电镜，进行二次电子图像(SEI)和背散射电子图像(BEI)的观察和慑像。 结果：HE染色切片的光镜观察显示，舌腹侧面可分为粘膜层、粘膜下层和肌层，各层境界清楚。粘膜层的细胞呈多层排列，游离面有一层无细胞结构的角质层，越靠近基底层，细胞数目越多；粘膜下层的结构比较疏松，可见数目众多的管腔结构，管腔的大小和形状不一。在肌层内，可见横行或纵形的肌束，其间也可见到管腔性结构，形态同粘膜下管腔结构相似。舌背侧面可分为粘膜层和肌层；但是，粘膜层表面可见大量的舌乳头，其结构贯穿粘膜层；缺乏粘膜下层，但粘膜基底层较厚；肌层特点与舌腹侧的结构相似。 酶双重染色观察显示，相邻组织切片的层次及各层结构，与HE染色切片的结构相似；但是，可明显区分管腔结构，淋巴管呈现深褐色5-Nase阳性反应；血管呈现深蓝色ALP阳性反应；在酶染组织切片上，淋巴管壁被染成深褐色，管壁薄，管腔较大；然而，与之伴行的血管则被染成深蓝色，管壁较厚，管腔较小。 扫描电镜观察显示，舌背侧粘膜表面，可见大量的舌乳头。丝状乳头均匀分布，排列整齐而密集，乳头直径大小不等，呈笋形，基底部呈花瓣状；在丝状乳头之间，还可见散在的菌状乳头，菌状乳头呈磨菇形或半球形，散布于丝状乳头之间，直径约100μm，其高度略低于丝状乳头，表层上皮呈鳞片状，形成一隆起的半球状或微凹的浅碟，中央有一圆形的味孔；在菌状乳头的周围，还可见到较浅的环沟。在舌腹侧粘膜，上皮细胞呈扁平状，细胞之间结合较紧密，但仍可见到大小不等的缝隙，有的粘膜上皮从表面剥离，细胞边界清楚，形状较规整，呈四边形或多边形状，上皮细胞表面，带有密集的微嵴。在舌的两侧缘，腹侧面与背侧面分界清楚，形态差异较大。酶染组织切片的扫描电镜观察显示，二次电子图像和背散射电子图像，均能分辨舌粘膜的各层组织结构。在淋巴管的内皮，由于有重金属铅的反应产物沉积，电子密度较高；所以，淋巴管呈现明亮的背散射电子图像。在舌腹侧和背侧的粘膜层、粘膜下层以及肌层内，均存在淋巴管；但是，各层结构内淋巴管的多少和管径不同，其中，在舌腹侧粘膜下层和肌层内，淋巴管较多、管径较大。同时，在舌乳头内，也可见到明亮的背散射电子图像。 透射电镜观察表明，舌内毛细血管的管壁较厚，内皮外有周细胞，内皮细胞之间的连接为紧密连接，没有开放性间隙存在，在血管内皮外，还有一层较厚而完整的基膜。然而，舌内毛细淋巴管仅由一层内皮细胞构成，管腔较大而且不规则，内皮外无周细胞，缺乏毛细血管那样的紧密连接，多呈重叠型连接，存在开放性间隙，管壁外缺乏基膜。毛细淋巴管的内皮，借助锚丝样结构，与周围的结缔组织纤维相连。 结论：1、形态学观察表明，大鼠舌腹侧与舌背侧的粘膜形态，存在较大的差异，可能与功能有关；2、在舌腹侧的粘膜下层和肌层内以及舌背侧的粘膜层和肌层内，均存在丰富的血管和淋巴管；3、各部内毛细淋巴管的数量大于毛细血管，毛细血管内皮细胞之间为连续型紧密连接，毛细淋巴管内皮细胞之间为开放型重叠连接；4、舌的结构特点提示，毛细淋巴管的管径和通透性，远远大于毛细血管，舌下含服多肽类药物的吸收途径，可能更易通过淋巴系统，然后进入血液循环。