粪便P53基因检测早期筛查大肠癌及其与中医证型相关性的研究

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目的:运用PCR-SSCP-EB染色技术检测大肠癌及大肠腺瘤病人粪便脱落细胞P53基因突变,比较其在大肠癌和大肠腺瘤之间的差异以及其与中医证型、癌肿周围转移情况之间的关系,希望从分子基因水平研究并建立一种高效特异、无创无痛、简便易行、患者依从性好、适宜人群筛查与早期诊断大肠癌的新方法,降低大肠癌发病率、死亡率。同时希冀寻找一种能够指导中医临床诊断、治疗的新方法。   方法:选择入院经纤维结肠镜或活检明确诊断为大肠癌及大肠腺瘤的患者,收集其大便。用分子生物方法提取其脱落细胞中的DNA后,经PCR-SSCP-EB染色技术检测其P53基因突变,研究粪便P53基因在大肠癌及大肠腺瘤中P53基因突变率的关系及其突变率与中医证型、癌肿周围组织的关系。   结果:经检验大肠癌患者的P53基因突变率与大肠腺瘤患者的突变率分别为57.89%和0%。两者比较存在显著差异(p<0.05),具有很好的诊断意义。在周围转移情况中,全部19例大肠癌患者大便中检出11例患者大便P53基因突变,根据改良Dukes分期,其中A期6例3例发生突变,B期5例1例发生突变,C期4例3例发生突变,D期4例全部发生突变,转移和未转移两组之间突变情况有显著差异(p<0.05)。全部25例患者根据中医辨证分型分为五型,分别归属为实证和虚证,实证者包括13例,其中6例发生基因突变,突变率为46.15%;虚证者包括12例,其中5例发生基因突变,突变率41.67%。两组经统计学确切概率法检验,实证和虚证间未见明显差异(P>0.05)。   结论:本研究从粪便中检测P53基因突变诊断筛查大肠癌和提示大肠癌周围转移情况是可行的;其与中医证型关系在本研究中没有显著相关性,用于指导大肠癌的中医临床分型尚需进一步研究。
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