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目的:骨骼肌损伤是法医学实践中最常见的软组织损伤类型之一。研究表明,骨骼肌损伤修复是受多因素调节的炎症性组织愈合过程。周细胞在婴幼儿发育期参与肌纤维的生长。在骨骼肌的损伤和疾病中,移植入体内的周细胞能够自发地与成肌细胞融合形成肌管,参与肌组织再生过程。目前周细胞在肌组织损伤后是否具有时间规律性表达尚不明确。在法医学实际应用中,对损伤时间的推断一直是需要解决的重要问题之一。通过观察小鼠骨骼肌挫伤后不同时间段周细胞数量的变化规律并探讨其在损伤时间推断中的作用,可以为法医学的肌肉损伤时间推断提供新的参考指标,并为肌肉损伤愈合治疗提供新的思路。研究方法:本研究选取雄性C57B6/L小鼠40只,制作小鼠腓肠肌挫伤模型,应用双重及三重免疫荧光染色法对骨骼肌挫伤后1d、3d、5d、7d、9d、14d、28d及对照组小鼠的周细胞形态及数量进行检测。通过GraphPad Prism 6.0软件,应用平均数±标准差(?±)及比率检验(Ratio)对数据进行统计学分析。应用独立样本单因子变异数分析(one-way ANOVA followed by Tukey test)或Fisher精确检验(Fisher’s exact test)对组间数据进行统计学分析,当P<0.05时认为组间差异具有统计学意义。结果:1、常规H&E染色检测结果显示,小鼠骨骼肌挫伤区内可见组织出血、肌纤维水肿及坏死等改变。2、NG2/PDGFRβ双重免疫荧光染色检测结果显示,与正常骨骼肌周细胞细长形态相比,挫伤区周细胞体积增大、形态变圆,胞核呈圆形。挫伤后5d至14d,挫伤中心区可见大量NG2~+/PDGFRβ~+的新生肌管。挫伤后骨骼肌周细胞数量变化、骨骼肌周细胞与总细胞数的比率具有时间规律性,并随损伤时间延长呈单峰性分布。挫伤中心区周细胞数量于挫伤后5d达到峰值;挫伤中心区周细胞与总细胞数的比率在挫伤后5d、7d达峰值;挫伤周边区周细胞数量在挫伤后5d和7d达到峰值;挫伤周边区周细胞与总细胞数的比率在挫伤后7d达到峰值。3、NG2/PDGFRβ/Pax7和NG2/PDGFRβ/MyoD1三重免疫荧光染色检测结果显示,挫伤区部分骨骼肌周细胞表达卫星细胞标记物Pax7或MyoD1。结论:1、小鼠骨骼肌挫伤后,挫伤区周细胞数量变化具有一定的时间规律性,提示其可能作为肌肉损伤时间推断的一个参考指标。2、小鼠骨骼肌挫伤后,挫伤区部分周细胞表达卫星细胞标记物,部分新生肌管表达周细胞标记物,提示周细胞参与骨骼肌损伤后的修复再生过程。