【摘 要】
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缺血性脑血管病是严重危害人类健康的三大疾病之一，目前仍缺乏有效的治疗手段，因此需要进一步探讨其发病过程中的分子机制，为治疗研发提供理论依据。近年来，发现半胱氨酸蛋白酶类
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缺血性脑血管病是严重危害人类健康的三大疾病之一，目前仍缺乏有效的治疗手段，因此需要进一步探讨其发病过程中的分子机制，为治疗研发提供理论依据。近年来，发现半胱氨酸蛋白酶类在缺血性脑损伤中起重要作用，由caspase-3介导的细胞凋亡机制更是备受关注，并发现calpain也可能在凋亡过程中起作用，此两种蛋白酶之间有一定的交互作用。本研究通过诱导原代培养的海马神经元缺氧/复氧，制备大鼠局灶性大脑中动脉缺血再灌注模型，分别从体外及体内两方面研究了半胱氨酸蛋白酶caspase-3及calpain在缺血性脑损伤中的作用，并进行了相应的干预治疗。结果发现，体外培养的海马神经元缺氧/复氧过程中caspase-3与calpain共同活化，用各自的抑制剂预处理后具有明显的神经保护作用，合用可产生协同效应。大鼠局灶性脑缺血/再灌注后出现明显的DNA损伤，单链损伤的出现早于双链损伤；caspase-3及calpain mRNA表达明显增强，活性蛋白表达增多，calpain的活化早于caspase-3，mRNA水平的表达增加出现于蛋白质增加之前；用caspase-3及calpain抑制剂干预治疗后DNA损伤数目减少，caspase-3及calpain表达减少，两种抑制剂合用具有协同作用。本研究结果提示caspase-3与calpain共同参与了缺血性脑损伤过程，它们之间可能存在一些相互作用，calpain可能作用于caspase-3的上游；针对这两种半胱氨酸蛋白酶进行干预，尤其是联合应用，可产生协同性神经保护作用，从而可能为缺血性脑血管病的临床治疗展示新的前景
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