鹅TRIM25基因鉴定、生物学特性及其抗病毒功能研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:king1981001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
三序基蛋白(TRIMs)是一个在先天免疫、细胞分化、转录调节以及细胞凋亡等多种生物学进程中有重要作用的蛋白家族。TRIM25蛋白是重要的干扰素诱导基因(ISGs)基因之一,在病毒感染过程中,TRIM25蛋白可以通过促进维甲酸诱导基因I(RIG-I)和线粒体信号蛋白(MAVs)的相互作用和信号传递诱导IFNs的转录和表达。本研究从鹅肺脏组织内克隆获得了鹅TRIM25基因序列,并从鹅TRIM25蛋白分子对IFNs和ISGs的转录调控及其对不同病毒的抑制作用等多方面探索了鹅TRIM25蛋白的生物学特性和抗病毒功能。1.鹅TRIM25序列鉴定及其结构特征本研究从四川白鹅肺脏组织内克隆得到鹅TRIM25基因序列(GenBank序列号:KX364385),该序列全长1892 bp,包括1662 bp的开放阅读框,编码一个554氨基酸的蛋白质。分子进化树和序列比对发现,鹅TIRM25基因与其他物种,尤其是禽类的TRIM25序列有很高的相似性。鹅TRIM25蛋白与鸭和火鸡聚在一簇,且鹅与鸭亲缘关系最近。绝大部分参与比对TRIM25蛋白RING结构域氨基酸序列符合CX2CX(9-39)CX(1-3)HX(2-3)C/HX2CX(4-48)CX2C锌指结构特征。2.鹅TRIM25的组织表达谱及其免疫学特性本研究利用荧光定量的方法检测鹅TRIM25在体内和体外的表达规律。结果显示:除血液外,鹅TRIM25基因在哈德氏腺、盲肠扁桃体和胸腺等免疫相关组织中表达量较高。在雏鹅法氏囊内,TRIM25表达量较高,而在3月龄鹅法氏囊内,其表达量相对较低。qPCR结果显示,不同的刺激剂以及病毒感染都能够显著性上调鹅TIRM25基因转录水平。这些材料证明鹅TRIM25参与宿主抗病毒免疫调节。3.TRIM25蛋白对病毒增殖能力的影响为了调查TRIM25蛋白对水禽DNA病毒(选择DPV病毒为代表)增殖的影响,本研究在DEFs中表达鹅TRIM25蛋白(GoTRIM25)和鸭RING结构域与鹅TRIM25融合蛋白(DuR-GoTRIM25),24小时后感染DEFs适应DPV病毒,并在感染后24小时和48小时观察细胞中荧光信号的多少和强弱结果显示。结果显示:DuR-GoTRIM25可以有效抑制DPV病毒增殖。为了调查TRIM25蛋白对水禽RNA病毒(以NDV病毒为代表)增殖的影响,本研究在DEF中表达GoTRIM25和DuRING-GoTRIM25蛋白,24小时后感染NDV病毒,并在感染后24小时和48小时收集细胞毒。qPCR结果显示,在病毒感染后24和48小时,GoTRIM25蛋白组细胞内病毒拷贝数与对照组无显著差异;而在DuR-GoTRIM25蛋白组,NDV病毒拷贝数与对照组相比显著性下降。说明:DuR-GoTRIM25可以有效抑制NDV病毒在体内的增殖。4.TRIM25蛋白对IFNs和ISGs基因转录的影响本研究在DEFs中表达GoTRIM25和DuR-GoTRIM25蛋白,然后利用qPCR技术检测IFNs和ISGs基因转录水平的变化。结果显示,GoTRIM25蛋白组与对照组相比,IFNs和ISGs基因转录水平并无显著性差异,而DuR-GoTRIM25蛋白组与对照组相比,无论是IFNs还是ISGs基因转录水平都显著性提高。说明:DuR-GoTRIM25可以有效的诱导宿主IFNs介导的抗病毒免疫反应。
其他文献
目的 观察缺氧诱导因子 1α (HIF 1α)与诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因在缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉的表达情况。方法常压间断缺氧法复制缺氧性肺动脉高压大鼠模型 ;右心
离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐([EMIM]Ac)对壳聚糖具有良好的溶解能力。利用新一代旋转流变仪哈克MARS-Ⅲ考察了壳聚糖-[EMIM]Ac溶液的稳态流变和动态流变性能。稳态流变
目的:有丝分裂的分子机制一直是分子生物学研究的热点问题,近年来对有丝分裂相关激酶的研究也取得了一定进展。在体细胞有丝分裂中,保守的丝苏氨酸激酶Aurora A和PLK1,对G2/M
肺癌发病率和死亡率高居不下,严重威胁人类生命健康。作为癌症三大治疗手段之一,放射治疗在临床肺癌治疗中得到广泛应用。放射治疗计划设计是放疗治疗过程中的关键环节,它也是整个放射治疗周期中最耗时、自动化程度最低的步骤。在放射治疗计划设计的过程中,医师需要对危及器官(Organs at Risk,OAR)与病灶进行勾画,勾画的效率和精度主要依赖于医师和物理师的临床经验和医学知识,勾画过程工作量大,效率低下
<正>2014年金秋,习近平在文艺工作座谈会上,发表了各方瞩目的讲话。讲话气象森然,文采斐然。其中提到的"从五四时期新文化运动、新中国成立到改革开放的今天",让笔者想到三个
由CO2和环氧丙烷的催化共聚制备了聚碳酸亚雨酯(PPC),向PPC引入环氧乙烷结构单元得到聚碳酸亚西亚乙酯(PPEC),用1HNMR等进行了结构表征,并用土埋法进行了生物降解性能的测定,结果表明PPC仅在分子量很低时才
外语教师关于外语学习和教学的基本信念对他们的课堂教学实践起着很重要的作用,外语教师所持有的教学信念直接影响到他们的课堂教学决策。2003年颁布的《普通高中英语课程标
贾谊思想体系由"道"发其端,其"道"吞吐众理,海纳百川,既含有创生万物之本体论意蕴,亦有待人接物之方法论意义。在"道"之基础上,贾谊设计了一整套以礼为核心、以民为根本的政
<正>2018年以来,缙云县水利局深入贯彻落实党的十九大精神,始终坚持"争先进位"的目标,大力推进水利基础设施网络建设,积极推进水生态文明建设,比学赶超、以干得助,水利工作亮
<正> 以色列人发明了一种新型的锂电池,用锂代替锌作电池的阴极,这种“超级电池”具有功率大、重量轻、寿命长等优点。其功率一般比市场上供应的长寿电池