福氏志贺菌对喹诺酮类耐药与gyrA、parC基因突变关系的研究

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目的: 1.了解广州地区部分福氏志贺菌对临床常用14种抗生素的耐药情况,为临床合理有效治疗菌痢提供实验论依据。 2.研究福氏志贺菌对喹诺酮类耐药与gyrA、parC基因突变的关系。 3.研究药物环境压力的变化与福氏志贺菌耐药产生的关系。 方法: 1.46株福氏志贺菌对14种临床常用抗生素的药物敏感性试验用K-B法进行检测,同时用琼脂稀释法检测其对诺氟沙星(NOR)、环丙沙星(CIP)及氧氟沙星(OFL)的最小抑菌浓度(MIC),具体要求参照美国临床实验室标准化研究所2005标准进行。 2.细菌DNA提取:采用煮沸法。 3.参照大肠埃希菌基因序列设计两对引物,分别用聚合酶链反应扩增福氏志贺菌及对照株(福氏志贺菌野生株2a301)的gyrA(295bp)、parC(387bp)基因,对扩增产物进行单链构象多态性分析(SSCP)及测序分析。 4.利用不同浓度NOR对福氏志贺菌(NOR敏感)进行体外耐药性诱导,再用琼脂稀释法检测诱导后的耐药株对NOR的最小抑菌浓度(MIC),然后对其扩增产物进行测序分析。 结论: 1.福氏志贺菌对临床常用的14种抗生素表现多重耐药,三代头孢菌素及IMP、TZP、ATM对其表现良好的体外抗菌活性。 2.gyrA基因突变是导致福氏志贺菌对喹诺酮耐药的主要原因,而ParC基因的突变可增加细菌对喹诺酮的耐药性。 3.药物选择性压力与细菌耐药形成有直接的关系,即药物选择性压力导致细菌基因突变发生从而促使细菌耐药产生。
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