成骨不全(osteogenesis imperfecta,OI)是一种常染色体显性遗传为主的单基因遗传病。约每两万个新生儿中就有一个OI患儿,以中国2002年-2011年10年的人口出生数推算,平均每年约有800个患儿。成骨不全临床表现主要为骨折和骨畸形,部分伴有蓝巩膜、耳聋等症状。根据临床症状,成骨不全症可分为Ⅰ型一Ⅶ型,其中,工型症状最轻,Ⅱ型最严重。该病90%是由于COL1Al/COL1A2基因突变导致工型胶原蛋白结构或骨含量的改变。目的通过临床资料分析本研究收集的1个成骨不全家系的遗传方式,鉴定该家系的OI分型,确定突变筛查的候选基因,寻找突变位点,以阐明该家系的遗传基础,为该病的诊断、预防和遗传咨询工作提供依据。方法本研究收集了一个来自中国河南的家系,共有35名家族成员,其中13人为患者,临床表现为轻度骨质脆弱,无骨骼畸形,身高正常或稍矮,巩膜为蓝色或淡蓝色,牙质发育正常或生长不全皆有。通过家系患者的临床症状与Sillence提出的经典分型标准的比对,其临床表现和症状的严重程度最接近Ⅰ型成骨不全的特征,并确定突变筛查的目的基因。抽取家系部分成员的外周血,抽提DNA并将先证者淋巴细胞建株。应用PCR扩增的方法对先证者及儿子的COL1A1基因所有的外显子与部分内含子区域进行突变检测,然后以建株的患者来源淋巴细胞系为材料,用RT-PCR和cDNA测序来研究突变对COL1A1基因剪接的影响。结果(1)突变筛查结果：该家系患者的COL1A1基因上发现一个未见报道的剪接位点突变c.3207+1G>A。(2)RT-PCR和cDNA测序结果：对逆转录后的cDNA进行序列分析显示,在c.3200位后出现大量套峰,推测该突变导致COL1A1基因转录后产生异常剪接本。cDNA克隆测序后发现该家系患者的COL1A1基因表达存在两个剪接本,其中一个剪接本为正常剪接本,另一个在43号外显子上缺失了8个碱基r.3200-3207del,导致COL1A1基因的阅读框发生改变,工型胶原蛋白α1链第1067位后的氨基酸序列全都发生改变,并产生截短蛋白。结论(1)发现了位于COL1A1基因的致病突变c.3207+1G>A是一个河南I型成骨不全家系的致病突变。(2)该家系COL1A1基因的致病突变c.3207+1G>A位于剪接位点,导致43号外显子3’末端产生新的剪切供体位点,并发生移码突变,产生截短蛋白。