玉足海参多糖对大鼠高脂血症的缓解作用及机制研究

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高脂血症作为一种全球性代谢疾病,严重危害着人们的身体健康。药物治疗是干预高脂血症最主要的手段,但其易产生耐药性且副作用大,因此开发天然生物活性成分弥补传统药物疗法的不足显得尤为重要。食源性多糖具有抗氧化、降血脂、降血糖和抗肿瘤等多种功效。玉足海参(Holothuria leucospilota)是富含功能性酸性粘多糖的海洋资源,但有关玉足海参多糖(HLP)及其消化产物的研究较为缺乏。本文以玉足海参为研究对象,初步探讨HLP及其消化产物的生物活性,阐明HLP的体内外消化酵解特性,揭示HLP对大鼠的高脂血症的缓解作用机制。本文主要研究内容和结论如下:(1)提取HLP并对其理化性质及抗氧化活性进行测定,通过体外模拟消化研究唾液、胃肠液对HLP的消化作用。结果显示:HLP的相对分子质量(MW)约为52.80k Da,单糖组成主要为鼠李糖(39.08%)和岩藻糖(35.72%),在高浓度(2 mg/m L)下具有良好的抗氧化活性。胃肠消化显著降低了HLP的MW(从52.80 k Da降低至14.67k Da和12.01 k Da),并保持了其较高的抗氧化活性。胃和肠内消化后Mw的降低分别是由聚合物的解聚和糖苷键的断裂引起的。(2)通过将HLP与人体粪便微生物混合发酵,并用不同剂量HLP灌胃正常小鼠4周,研究HLP的体内外酵解特征。结果发现,在体外酵解过程中,粪便培养液的p H(由6.9降为5.8)和还原糖含量(由0.85 m M降为0.05 m M)降低,短链脂肪酸(SCFA)含量显著增加(p<0.05),并伴有游离单糖(鼠李糖、岩藻糖、木糖)产生。在小鼠体内消化过程中,多糖组粪便的p H值降低,SCFA浓度增加,其肝脏抗氧化活性显著提高(p<0.05),说明HLP能被微生物酵解利用,促进SCFA等代谢产物的产生,并提高肝脏抵抗自由基损伤的能力。(3)给予大鼠高脂饲料,随机分为高脂组和HLP低、高剂量组,以正常饲料喂养的大鼠作对照,灌胃干预4周。结果表明:HLP能改善由高脂饮食诱发的脂代谢(TC、TG及LDL-C)紊乱,炎症因子水平(TNF-α、IL-6、IL-10和IL-12)异常以及氧化应激能力(SOD、MDA和CAT)和肝脏功能(AST和ALT)受损。病理学结果显示,在HLP摄入后,肝脏组织炎症细胞浸润和脂肪堆积现象得到减轻。说明HLP能够改善大鼠的脂代谢紊乱、炎症因子水平异常和脂质过氧化等高脂血症症状,并对肝脏损伤具有缓解作用。(4)采用代谢组学、高通量测序及免疫印迹等技术,分析肝脏脂质合成和炎症相关基因和蛋白表达,鉴定血清中代谢产物,进一步研究HLP改善高脂血症的作用机制。结果显示,HLP可被肠道微生物利用产生SCFA,参与脂质代谢调节。HLP通过调控NF-κB通路和减少ACC和CD36的表达来抑制肝脏脂质积累和胰岛素过量分泌,从而改善大鼠高脂血症。此外,本研究共识别出6个生物标记物,HLP能调节高脂血症大鼠血清中nadolol和glycodeoxycholicacid等代谢终产物含量缓解肝损伤。
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