三氧化二砷抑制鸡MD肿瘤血管生成的研究

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马立克氏病(MD)是由疱疹病毒B群马立克氏病毒引起的一种鸡的恶性淋巴肿瘤性疾病,并可导致宿主的免疫抑制,最终因受害器官功能障碍和恶病质而死亡。尽管已经研制出有效的疫苗,但由于免疫失败等诸多原因,各地免疫鸡群仍陆续发生MD病例,给本病的控制和消灭带来了巨大的困难,严重影响了养鸡业的健康发展。同时,MD作为世界上第一个用疫苗预防获得成功的病毒性肿瘤病例,它在研究病毒性肿瘤发生、发展和免疫上的作用,也受到了医学界的关注。抑制肿瘤血管生成治疗肿瘤是一种全新的肿瘤治疗手段,因其有其他疗法无法比拟的优越性,得到了学者们的密切关注。但到目前为止,仍然没有MD肿瘤血管生成以及砷制剂对MD血管生成影响方面的相关研究。本试验以伊莎公鸡为试验对象,人工复制MD模型,腹腔注射As2O3,通过对肿瘤内VEGF、KDR、bFGF及iNOS mRNA的表达水平,肿瘤血管内皮细胞凋亡,NO-NOS活性系统的检测,以探讨的As2O3抑制MD血管生成抑制肿瘤生长的机制,为比较医学和临床兽医治疗肿瘤提供理论依据。研究结果表明:1.首次测定了腹腔注射As2O3鸡的LD50为8.877mg/kg体重,及As2O3对鸡的轻度蓄积作用,为临床治疗用药提供了依据。2.通过临床剖检变化和组织学观察,证实MD疾病模型的复制成功。3.通过TUNEL法染色观察,证实As2O3能够诱导肿瘤血管内皮细胞发生凋亡,表明As2O3可以通过促进肿瘤血管内皮细胞凋亡,抑制肿瘤血管的生成。4.鸡感染vMDV后,体内NO含量和NOS活性升高,RT-PCR方法检测iNOS mRNA表达水平也明显升高;供砷后NO含量、NOS活性和iNOS mRNA表达都呈减低趋势。这表明MD肿瘤组织可以诱导分泌出大量的iNOS,调节NO的合成,而As2O3能够通过抑制肿瘤分泌iNOS,降低NO的合成量,减少内皮细胞的分裂、增生,抑制肿瘤血管新生,5.RT-PCR方法检测肿瘤组织VEGF和KDR mRNA表达水平。结果表明鸡感染vMDV后,VEGF和KDR mRNA表达水平升高;而As2O3能降低VEGF和KDR mRNA的表达,并使其趋于正常,这证明As2O3能下调VEGF和KDR mRNA的高表达,减少VEGF的自分泌作用,从而抑制肿瘤血管的新生。6.RT-PCR方法检测肿瘤组织bFGF mRNA表达水平。结果表明鸡感染vMDV后,bFGF mRNA表达水平升高;腹腔注射As2O3能降低bFGF mRNA的高表达。进一步说明As2O3的持续作用,可以显著的降低bFGF mRNA的高表达,降低bFGF等血管生长相关因子的自分泌和旁分泌机能,从而减少血管的生成,抑制肿瘤生长。
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