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galectin-3作为多功能的β-半乳糖结合蛋白，其抑制剂被认为是一种新型的抗肿瘤药物。其中，由108-250位氨基酸组成的N末端截短型人galectin-3(galectin-3C)因抗肿瘤效果良好且无毒副作用，被考虑作为相对安全可靠的抗癌药物，但需作更进一步的研究。本研究选用中华蟾蜍与日本蟾蜍皮肤为研究对象，克隆并分析了两者galectin-3基因的cDNA序列，构建的原核表达重组质粒为进一步研究galectin-3C生物学功能及其应用奠定了基础。具体结论如下：1、以日本蟾蜍皮肤cDNA质粒文库为模板筛选出5条galectin-3全长cDNA序列(登录号为JQ765589-JQ765593)，随后以中华蟾蜍皮肤总RNA反转录第一链cDNA为模板，克隆galectin-3ORF序列至pGM-T载体，测序后确认获得9个cDNA克隆(X1-2登陆号为AEX58672.1)。其中3条(3/14)序列为N末端缺失突变体。2、利用生物信息学软件进行序列分析，结果表明：①同一个体的蟾蜍皮肤galectin-3cDNA呈现序列多态性，中华蟾蜍galectin-3C区域具有高密度的单核苷酸多态性(SNP)，每20bp出现1个SNP。推测该多态性可能有益于蟾蜍个体应对复杂多变的环境，增强其对环境的适应能力；②预测中华蟾蜍galectin-3蛋白在Ser6、Ser186有潜在的丝氨酸磷酸化位点，N末端缺乏信号肽和跨膜结构域，主要定位于胞核、细胞质，属于胞内蛋白。中华蟾蜍galectin-3具有与人类同源蛋白相似的结构特征；③依据与一些哺乳动物的galectin-3具有相同的磷酸化位点、糖基结合位点和相关基序，预测中华蟾蜍galectin-3具有Ser6磷酸化与CRD糖基结合功能。3.根据生物信息学分析结果设计引物，使用pET-28b(+)载体构建三种不同长度galectin-3C的原核表达重组质粒，优化重组蛋白诱导表达条件。