背景与目的：肝癌在全世界性范围内都是一种严重危害人类健康的致死性疾病。在各种恶性肿瘤中，肝癌的发病率及病死率均较高。尽管以手术切除为主要手段的肝癌治疗手段取得了长足的进步，但肝癌的转移一直都制约着肝癌患者的治疗效果，包括确诊时已出现的和伴随手术切除后复发的肝癌转移，近90%的肝癌患者因此而最终病死。因此，深入探索肝癌的发生以及转移的分子学机制，研发有效的肝癌治疗新方法、新药物具有重要的实际意义。多种分子及其构成的信号网络参与了肝癌的发生展过程的调控。ACAP4分子是Arf6的特异性GAP酶，可通过对Arf6的调节发挥对肝癌细胞侵袭和转移的调控作用。同时，ACAP4的分子作用受到分子本身一些氨基酸位点磷酸化的调节。本研究拟通过动物体内小分子肽LCD313对ACAP4磷酸化的抑制作用，探讨抑制ACAP4磷酸化对肝癌转移的影响，以及为研发ACAP4磷酸化抑制药物对抗肝癌提供依据。方法与结果：首先建立一种能够表达荧光素酶的肝癌细胞株MHCC97-H-LUC，并将MHCC97-H-LUC细胞株进行裸鼠肝脏原位移植，通过活体荧光成像系统动态检测并量化MHCC97-H-LUC细胞在裸鼠体内的生长及转移情况，以此建立一种可用来动态检测并量化分析裸鼠肝癌原位移植模型。以此模型为基础，通过给予荷瘤裸鼠体内注射不同剂量的ACAP4磷酸化抑制剂LCD313，观察不同药物剂量组裸鼠体内MHCC97-H-LUC细胞的生长和转移的差异，判断LCD313对肝癌转移的影响作用。通过活体荧光成像检测裸鼠体内MHCC97-H-LUC的发光量以及病理学检测，发现LCD313确实抑制了肝癌细胞株MHCC97-H-LUC在裸鼠体内的生长及转移。但在一定剂量范围内LCD313，不同药物剂量对肿瘤转移的抑制作用并无明显差异，而且随着药物剂量的进一步加大，LCD313表现出对裸鼠的毒副作用。结论：本实验改进的MHCC97-H-LUC细胞株是一种良好的工具细胞，利用活体成像技术对裸鼠肝癌原位移植的MHCC97-H-LUC细胞株进行检测，可以精确地反应出肝癌细胞在裸鼠体内的生长及分布情况，而且通过荧光强度的大小可以间接反应移植瘤的体积。可以应用于裸鼠肝癌原位移植模型的检测。本实验表明，LCD313在动物体内能够抑制ACAP4一些氨基酸基团特别是Y733位点的磷酸化，进而改变ACAP4的分子构象，封闭活性基团，抑制ACAP4的活性。进而阻断了Arf6活性/非活性的周期性循环、抑制细胞质膜处对细胞骨架蛋白重排，降低肿瘤细胞的细胞动力；同时阻断EGF激活的Grb2对integrin β1的循环调控。因此，LCD313对ACAP4磷酸化的抑制作用可减弱肝癌细胞的侵袭和迁徙能力，抑制肝癌的转移。我们展望，以抑制ACAP4磷酸化为抑制肝癌转移药物靶点机制，通过对LCD313的不断改进，将有更多的抗肝癌生长和转移的药物应用于临床。