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随着农药种类及数量的不断增多,实现多残留检测已成为农药免疫分析方法的必然趋势。本文以硝酸纤维素膜为载体,抗原为捕获探针,胶体金做标记材料,制作了一个含有7个抗原抗体组合的可视化免疫芯片,可同时检测三唑磷、对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、甲氰菊酯、克百威、噻虫啉、百菌清和多菌灵9种农药。通过对免疫芯片反应的各项条件进行优化,确定了间接竞争检测模式、芯片载体类型、反应抗原抗体的浓度、金标二抗的稀释倍数、封闭液、金增强液、反应缓冲液种类、pH、NaCl浓度、反应缓冲液中有机助溶剂含量及各个步骤的反应时间。在最适优化条件下,三唑磷检测灵敏度(ICso)、最低检出限(LOD, IC10)及肉眼检出限(vLOD)分别为0.41ng/mL、0.02ng/mL、1ng/mL;甲基对硫磷为10.77ng/mL、0.38ng/mL、100ng/mL;甲氰菊酯为2.24ng/mL、0.13ng/mL、10ng/mL;克百威为27.22ng/mL、3.76ng/mL、100ng/mL;噻虫啉为46.52ng/mL4.51ng/mL、100ng/mL;百菌清为1.17ng/mL、0.20ng/mL、5ng/mL;多菌灵为0.61ng/mL、0.07ng/mL、5ng/mL;对硫磷为279.5ng/mL、2.4ng/mL、1000ng/mL;杀螟硫磷为77.9ng/mL、0.6ng/mL、500ng/mL.此灵敏度可与经典的ELISA法相媲美,各药的最低检出限均可满足我国对食品中农药最大残留限量MRL值的规定(GB2763-2014)。实验结果表明,该免疫芯片分析方法具有较好的准确性和精密度。将其应用于蔬菜、水果和谷物类样品检测,在首先确定了基质效应及稀释倍数后,样品添加回收率实验结果表明,绝大多数农药的添加回收率为70.1%-119.1%,变异系数为4.12%-19.93%,满足农药残留分析的基本要求。仪器比对实验表明,该方法与质谱仪具有较高的相关性,相关系数(R2)高达0.94。本论文中建立的免疫芯片体系作为一个雏形,探索了集成式农药多残留免疫检测芯片的研究方法和技术思路,为后期开发基于免疫芯片的廉价化、便携化和系列化的农药多残留现场速测技术及其产品开发奠定了良好的理论和实践基础。