基于磷光分子印迹纳米复合材料用于生物蛋白识别分析

来源 :山西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lonlinyang
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蛋白质作为生物功能的主要参与者,已成为生命科学研究的重点对象之一,但生物样品成分复杂,如何靶向识别目标蛋白已成为蛋白组学和疾病诊断领域研究的瓶颈。量子点(Quantum Dots,QDs)与分子印迹聚合物(Molecular Imprinting Polymers,MIPs)相结合为蛋白质的光学识别分析开启了全新的解决方案。本研究选择细胞色素c与转铁蛋白两种蛋白作为模板分子,将具有良好抗背景荧光干扰的室温磷光(Room-temperature phosphorescence,RTP)Mn-ZnS QDs与分子印迹技术相结合,发展了2种兼具特异性高和抗干扰能力强的纳米复合传感器,并成功应用于实际样品中蛋白质的特异性识别分析。主要研究内容如下:(1)以RTP Mn-ZnS QDs为纳米支撑材料,以表面分子印迹聚合物(Surface molecularly imprinted polymers,SMIP)为人工抗体,并将两者结合制备了一种能够选择性识别和分析细胞色素c(Cytochrome c,Cyt c)的RTP型QDs-SMIP人工抗体纳米复合材料。由于本研究采用QDs的RTP性质,避免了生物体液背景荧光和散射光的干扰,所以该方法特别适用于生物体液中Cyt c的痕量光学识别。另外,Cyt c能够通过电子转移引起QDs RTP强度的降低,因此该方法也能够实现对Cyt c的定量分析,方法检出限为0.015μM,用于测定人血清和尿液Cyt c的加标回收率96%-104%。(2)以介孔纳米SiO2为基质,Mn-ZnS室温磷光(RTP)QDs(PQDs)为发光材料,发展了一种兼具特异性高和抗干扰能力强的RTP型蛋白介孔印迹材料(SiO2-PQDs-MIPs),并应用于靶蛋白的识别分析(转铁蛋白Transferrin,Trf为例)。该方法可以实现Trf的定量分析,方法检出限为0.014μM,用于测定人血清和尿液中Trf的加标回收率为94.5%-102.0%。由于该SiO2-PQDs-MIPs对蛋白的传感信号是基于PQDs的RTP性质,因此可以避免复杂生物样品背景荧光和散射光的干扰,所以SiO2-PQDs-MIPs特别适用于生物体液中蛋白质的特异识别和精确定量检测。
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