【摘 要】
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目的:由于胃癌严重威胁人类健康,开发新的治疗胃癌的化疗药物迫在眉睫。蒲公英根提取物(DRE)具有较强的抗癌活性同时对正常细胞的影响很小。迄今为止,人们对DRE的抗癌机制知
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目的:由于胃癌严重威胁人类健康,开发新的治疗胃癌的化疗药物迫在眉睫。蒲公英根提取物(DRE)具有较强的抗癌活性同时对正常细胞的影响很小。迄今为止,人们对DRE的抗癌机制知之甚少。因此,我们研究了DRE对MGC803细胞活力、细胞周期、凋亡率、线粒体膜电位(MMP)等的影响,以及对Bcl-2、Bax、活性氧(ROS)、细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、DNA修复酶(PARP)与ATP的生成影响。然后我们应用傅立叶变换红外光谱(FTIR)研究DRE诱导MGC803细胞凋亡后主要生物化学组成(蛋白质、脂类与核酸)的变化。本研究旨在探讨DRE对MGC803细胞的作用及其机制,为DRE作为抗胃癌药物的应用提供依据。方法:索式提取器提取DRE。紫外光谱与红外光谱分析DRE成分。用不同浓度的DRE(0、2.5、4.5、6.5和8.5mg/m L)处理MGC803细胞。CCK-8法检测细胞增殖。细胞计数法检测细胞存活率。细胞划痕实验检测细胞迁移能力。流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、MMP与ROS。比色法检测ATP合成与Caspase-3活性。ELISA法检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-9与PARP的表达水平。琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化。傅里叶变换红外光谱检测细胞内主要生物化学组成的变化。结果:DRE的主要成分为蛋白质与多糖。DRE显著抑制MGC803细胞的活力与迁移能力,阻滞细胞周期于G2/M期。DRE使细胞内ROS水平升高、Bax/Bcl-2比值上升、MMP下降、ATP生成减少、细胞色素C释放、Caspase-9/-3活化、PARP裂解与DNA断裂,最终诱导细胞凋亡。此外,DRE处理后的细胞蛋白质结构、脂类结构与含量、核酸结构与含量发生明显的改变。结论:DRE通过线粒体途径诱导MGC803细胞凋亡,并引起细胞内生物化学组成的变化,同时红外光谱在分子水平上揭示了上述变化。以上结果为深入了解DRE诱导胃癌细胞凋亡及作用机制提供有力补充。
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